1、樣本采集時間若對同一病人作多次測定最好每次在同一時間收集標本,便于比較,以減少人體內(nèi)各分析物晝夜變化的影響。晝夜變化有內(nèi)在因素(主要取決于人是在活動還是在睡眠狀態(tài)),以及外來因素(如飲食、體育活動或其他和某一特定時間有關(guān)的活動)。
血樣標本采集理想的時間是早晨7:00到8:00,尤其在目的為監(jiān)測時,最后一次食物和液體攝入應(yīng)在前一天下午6:00到7:00;對于某些試驗要有特殊的說明。如做糖耐量試驗或餐后兩小時血糖的病人,一定要詳細告訴病人何時抽血等事宜。
2、采樣系統(tǒng)的使用長期以來,我國臨床生化采血沒有統(tǒng)一的器材,有的使用經(jīng)反復洗滌的玻璃試管,有的使用一次性塑料試管,使用中存在不少問題,如試管洗滌不干凈造成溶血或殘存物質(zhì)對測定的干擾;軟質(zhì)塑料試管采血,血液自然凝固析出血清時間長,容易造成血清中被檢成分的改變,如葡萄糖酵解、酶活性降低、細胞中鉀離子外溢等。
血樣標本最好采用真空采血系統(tǒng),這是保證質(zhì)量的重要措施之一。目前推廣使用真空采血系統(tǒng)可有效避免用錯抗凝劑,保證了血與抗凝劑比例,解決了交叉污染,防止標本溶血,加分離膠還可加速血清分離等有效措施。真空采血系統(tǒng)采集血液后,應(yīng)輕輕顛倒混勻5~10次,以確??鼓齽┖痛倌齽ǚ蛛x膠)發(fā)揮作用。
3、正確使用抗凝劑 目前常用的抗凝劑有肝素、EDTA鹽和枸櫞酸鹽,實驗室應(yīng)正確使用相應(yīng)的抗凝劑,且標本采集時應(yīng)注意血液與抗凝劑的比例。
?。?)肝素:通常用肝素鋰,濃度為14.3IU/mL血,用量范圍為12~30IU/mL,常用于血粘度測定,血氣酸堿分析及酶學檢查。
?。?)EDTA鹽:通常用EDTA-K2,濃度為1.5~2.0mg/dl,常用于全血細胞計數(shù)及血粘度測定。
?。?)枸櫞酸鹽:通常用枸櫞酸鈉,濃度為109mmol/L或3.8%,主要用于凝血試驗(抗凝劑與血液1:9混合,過高或過低,均可影響PT、APTT的結(jié)果),RBC沉降率試驗(抗凝劑與血液1:4混勻)。
4、標本的運送血液標本采集后應(yīng)盡快從采血現(xiàn)場運送至實驗室,盡快檢驗,減少標本的放置時間,因為細胞的代謝、光學、化學反應(yīng)、微生物分解及其蛋白質(zhì)酶的裂解都將對生化檢測結(jié)果產(chǎn)生影響。
目前,多數(shù)醫(yī)院住院病人的血液標本都是由夜班護士完成采血,由于工作的特殊性,任務(wù)重、時間緊,大多數(shù)護士采集時間在早晨5~6點,而檢驗時間在上午9~10點開始,這樣無疑就耽擱了四五個小時。血標本的化學成分在放置后可有某些變化。
如標本放置時間過久,可由于糖酵解而導致血糖下降;有些物質(zhì)可以通過紅細胞膜或由于紅細胞的破壞而進入血漿,如紅細胞內(nèi)鉀、乳酸脫氫酶、轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶等;血漿中無機磷可由紅細胞內(nèi)有機磷酸酯水解而增加,因此測無機磷時應(yīng)及分離血清;有些不穩(wěn)定的酶放置后易失活,如酸性磷酸酶等。因此,常規(guī)生化標本采集后應(yīng)由專人及時收取或送檢,急診標本隨留隨送。采集后的標本放置時間越短,結(jié)果的變異就越小。
如標本確實不能及時檢測,必須貯存時應(yīng):(1)防止蒸發(fā):血標本應(yīng)貯存在密閉的容器中,即使貯存在冰箱內(nèi),蒸發(fā)的危險性依然存在。(2)血標本貯存的溫度越低,血樣保存時間越長。但是特殊指標如血液形態(tài)學指標除外。(3)血樣保存應(yīng)豎立放置以加快凝血。(4)避免晃動血樣,以免產(chǎn)生溶血。(5)貯存時注意避光,盡量隔絕空氣。(6)血樣深冷凍再溶解后,應(yīng)重復混勻數(shù)次,以防檢測物質(zhì)分布不均。
全血采取后應(yīng)盡快自然地使血清(漿)從與血細胞接觸的全血中分離出來。一般應(yīng)于采血后2小時內(nèi)分離出血清或血漿,以防止血細胞內(nèi)外多種成分發(fā)生變化。血清標本離心前一般要先自行凝集,所等的時間包括凝血和血塊收縮時間,通常這個過程大致要30分鐘,加促凝劑時凝集可加快,切勿用竹簽剝離凝血塊,因人為剝離會誘導溶血。
血漿標本的最大優(yōu)點在于及時檢測,而不需要等到血液凝固后檢測,而且可以避免血液凝固引起的輕度溶血所導致的錯誤,血漿標本還可避免血凝過程中RBC釋放鉀離子和酶,使得鉀離子和部分酶增高,另一方面血清標本由于缺乏纖維蛋白原,而使血清總蛋白較低。