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巨噬細胞功能檢測-檢驗主管技師輔導:
人巨噬細胞可從外周血或經(jīng)斑蝥激發(fā)的皮皰液中獲取醫(yī)學教育網(wǎng)|搜集整理,也可從肺灌洗液或患者腹膜透析液中分離,但操作繁鎖,得量不多。許多實驗室在進行基礎(chǔ)或配合臨床研究巨噬細胞功能及其與疾病的關(guān)系、或篩檢免疫增強藥物和探討其作用機制時,常選用小鼠腹腔巨噬細胞為研究對象,常用的檢測方法如下。
(一)炭粒廓清試驗
正常小鼠肝中枯否細胞可吞噬清除90%炭粒,脾巨噬細胞約吞噬清除10%炭粒,據(jù)此給小鼠定量靜脈注射印度墨汁(炭粒懸液),間隔一定時間反復取靜脈血,測定血中炭粒的濃度,根據(jù)血流中炭粒被廓清的速度,判斷巨噬細胞的功能。
(二)吞噬功能的檢測
巨噬細胞具有較強的吞噬功能,實驗室常用比細菌大的細胞性抗原作為被吞噬顆粒,如雞紅細胞。其檢測原理是將受檢細胞與適量的顆粒抗原混合后,置 37℃保溫0.5~1h,其間時加振搖,最后離心取測定細胞制成涂片,染色鏡檢,分別計數(shù)出吞噬百分比和吞噬指數(shù)。各實驗室應(yīng)根據(jù)自己的條件建立正常參考值。
(三)巨噬細胞溶酶體酶的測定
巨噬細胞富含溶酶體酶,如酸性磷酸酶、非特異性酯酶、溶菌酶等,測定這些酶的活性也是衡量巨噬細胞功能的實用指標之一。