醫(yī)學教育網(wǎng)臨床醫(yī)學檢驗主管技師：《答疑周刊》2016年第23期：

【臨床檢驗基礎】

學員提問：腎上腺皮質功能減退，為什么氯減低？

解析：腎上腺皮質功能減退時，由于醛固酮類皮質激素分泌減少，腎小管再吸收鈉、氯不足，尿鈉與氯化物排出增多，引起血氯減低。

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學員提問：percoll分離法由上到下順序是？

解析：Percoll是經(jīng)過聚乙烯吡咯烷酮(polyvinylpyrolidone，PVP)處理的硅膠顆?；鞈乙?，對細胞無毒性和刺激性。Percoll混懸液的硅膠顆粒大小不一，經(jīng)過高速離心后，可形成一個連續(xù)密度梯度，將比重不同的細胞分離純化。

將1份10XPBS與9份Percoll貯存液混合，制成等滲Percoll懸液，此懸液被認為是100%Percoll懸液，其密度為1.1294g/ml.用PBS或細胞培養(yǎng)液稀釋100%Percoll而獲得所需密度的Percoll分離液用于相應細胞的分離。若分離淋巴細胞應使用1.0777g/ml，配制時用稀釋液稀釋60%即可。

取比重1.077的Percoll分離液Xml與離心管中，將等倍稀釋的抗凝血1/2Xml小心疊加在分離液上，經(jīng)水平離心(1500rpm)后，便得四個細胞層，從而分離出淋巴細胞。表層為死細胞殘片和血小板，底層為粒細胞和紅細胞，中間有兩層，上層富含單核細胞，下層富含淋巴細胞。

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學員提問：離子交換層析的主要原理是利用物質什么？

解析：離子交換層析是根據(jù)蛋白質所帶電荷的差異進行分離純化的一種方法。蛋白質的帶電性是由蛋白質多肽中帶電氨基酸決定的。由于蛋白質中氨基酸的電性又取決于介質中的pH，所以蛋白質的帶電性也就依賴于介質的pH。當pH較低時，負電基團被中和，而正電基團就很多； 在pH較高時，蛋白質的電性與低pH時相反。當?shù)鞍踪|所處的pH，使蛋白質的正負電荷相等，此時的pH稱為等電點。離子交換層析所用的交換劑是經(jīng)酯化、氧化等化學反應引入陽性或陰性離子基團制成的，可與帶相反電荷的蛋白質進行交換吸附。帶有陽離子基團的交換劑可置換吸附帶負電荷的物質，稱為陰離子交換劑，如DEAE-纖維素樹脂；反之稱為陽離子交換劑，如CM-纖維素樹脂。不同的蛋白質有不同的等電點，在一定的條件下解離后所帶的電荷種類和電荷量都不同，因而可與不同的離子交換劑以不同的親和力相互交換吸附。當緩沖液中的離子基團與結合在離子交換劑上的蛋白質相競爭時，親和力小的蛋白質分子首先被解吸附而洗脫，而親和力大的蛋白質則后被解吸附和洗脫。因此，可通過增加緩沖液的離子強度和/或改變酸堿度，便可改變蛋白質的吸附狀況，使不同親和力的蛋白質得以分離。

【臨床免疫學和免疫檢驗】

學員提問：老師你好，反向間接凝集反應測的是抗體還是抗原？

解析：反向間接凝集反應紅細胞包被抗體，用以檢測抗原的血凝反應，稱為反向間接血凝反應(RPHA)。

下列疾病不屬于Ⅰ型變態(tài)反應的是()。

A、支氣管哮喘

B、藥物過敏性蕁麻疹

C、過敏性鼻炎

D、過敏性休克

E、血清病

【正確答案】 E

【答案解析】 IgE的Fc段能與肥大細胞和嗜堿性粒細胞表面的受體結合，介導Ⅰ型變態(tài)反應的發(fā)生，因此又稱親細胞抗體。IgE多由鼻腔、扁桃體、支氣管、胃腸道黏膜固有層的漿細胞所產(chǎn)生。Ⅰ型變態(tài)反應性疾病包括：支氣管哮喘、藥物過敏性蕁麻疹、過敏性鼻炎、過敏性休克等。

學員提問：血清病是幾型變態(tài)反應？

解析：血清病屬于Ⅲ型超敏反應。血清病是指因輸注異種血清導致的Ⅲ型變態(tài)反應。

【臨床血液學】

學員提問：Rh陰性血的母親，小孩Rh陽性,換血需要用陰性還是陽性的洗滌紅細胞？

解答：Rh陰性的洗滌紅細胞。

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