尿液蛋白質(zhì)檢查的檢測(cè)方法及評(píng)價(jià)!速記!
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1.尿蛋白定性試驗(yàn)為蛋白尿的過(guò)篩試驗(yàn)。
(1)試帶法:利用pH指示劑的蛋白誤差原理。本法對(duì)清蛋白較敏感,對(duì)球蛋白的敏感性僅為清蛋白的1/100~1/50,且可漏檢本周蛋白。尿液pH值增高也可產(chǎn)生假陽(yáng)性。本法快速、簡(jiǎn)便、易于標(biāo)準(zhǔn)化,適于健康普查或臨床篩檢。
(2)加熱乙酸法:為傳統(tǒng)的經(jīng)典方法。加熱煮沸使蛋白變性、凝固,然后加酸使尿液pH接近尿蛋白質(zhì)等電點(diǎn)(pH4.7),在含有適量無(wú)機(jī)鹽狀況下,蛋白質(zhì)更易于變性下沉,同時(shí)可消除某些磷酸鹽(如無(wú)定形磷酸鹽、銨鎂磷酸鹽等)在堿性條件下易析出結(jié)晶、造成混濁的干擾。
【操作過(guò)程】加熱-加酸-再加熱
①在試管內(nèi)加清晰尿液至管高2/3處,渾濁尿液標(biāo)本應(yīng)離心取上清液再試驗(yàn)。
②用木夾夾持(或手持)試管下1/3處,加熱煮沸試管上1/3處內(nèi)的尿液。
③將試管上部加熱處尿液與試管下部未加熱尿液比較,觀察有無(wú)渾濁變化。
④在試管中加入5%冰乙酸2滴,再煮沸尿液,立即觀察結(jié)果,結(jié)果的判斷及報(bào)告形式同磺基水楊酸法。
(3)磺基水楊酸法:又稱(chēng)磺柳酸法。操作簡(jiǎn)便、反應(yīng)靈敏、結(jié)果顯示快,與清蛋白、球蛋白、糖蛋白和本周蛋白等均能發(fā)生反應(yīng);敏感度達(dá)0.05g/L,因而有一定的假陽(yáng)性。被NCCLS作為干化學(xué)法檢查尿蛋白的參考方法,并推薦為檢查尿蛋白的確證試驗(yàn)。
根據(jù)反應(yīng)的混濁程度,作出尿蛋白的定性或半定量判斷:
陰性(-,不顯渾濁,尿液外觀仍清晰透明)
微量(±,輕微渾濁,隱約可見(jiàn))
陽(yáng)性(+,明顯白色渾濁,但無(wú)顆粒出現(xiàn))
陽(yáng)性(++,稀薄乳樣渾濁,出現(xiàn)顆粒)
陽(yáng)性(+++,乳濁樣,有絮片狀沉淀)
陽(yáng)性(++++,絮狀渾濁,有大凝塊下沉)
2.尿蛋白定量試驗(yàn):沉淀法、比色法、比濁法、染料結(jié)合法、免疫測(cè)定法和尿蛋白電泳法等。
比色法:常用雙縮脲比色法,為蛋白質(zhì)定量測(cè)定經(jīng)典方法。本法顯色穩(wěn)定,對(duì)清蛋白、球蛋白的反應(yīng)都有同樣的靈敏度,但靈敏度低。
染料結(jié)合法:方法有考馬斯亮藍(lán)法、麗春紅S法等??捡R斯亮藍(lán)染料易沉著在比色杯上,應(yīng)注意洗脫。
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