醫(yī)學教育網(wǎng)小編整理了針對β-內(nèi)酰胺酶的常見檢測方法如下，請各位考生仔細查看。

（一）微生物活性消失法

此法是以一株對青霉素高度敏感的枯草芽胞桿菌的指示菌，如待檢菌株產(chǎn)生β內(nèi)酰胺酶，破壞了青霉素，則在劃線兩邊有枯草芽胞菌生長，否則指示菌仍呈很大抑菌環(huán)。

β內(nèi)酰胺酶破壞β內(nèi)酰胺環(huán)，碘與被打開β內(nèi)酰胺環(huán)結合，使藍色的淀粉-碘復合物轉變成無色。

方法：用pH6.0磷酸緩沖液配制青霉素懸液6000μg/ml，取該液0.1ml置于微量稀釋板凹孔中，挑選檢測菌株數(shù)個菌落混懸于其中，搖動30min，靜置室溫中1h，加淀粉液2滴，再加碘液1滴，混合，立即觀察顏色變化，陽性者當加入碘液后，首先立即出現(xiàn)藍色、如在10min內(nèi)消失藍色，提示該菌產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶。

（三）酸測量法

青霉素被β-內(nèi)酶胺酶水解后成青霉素酸，pH值下降6.8以下，用酚紅指示劑，由紅（紫）色（原液：枸櫞酸緩沖液pH8.5）→黃色（pH6.8以下）。

（四）頭孢硝基噻吩顯色反應

頭孢硝基噻吩（Nitrocefin）的β-內(nèi)酰胺環(huán)被β-內(nèi)酰胺酶打開，基質(zhì)由黃色變成紅色。

液體方法：10mg頭孢硝基噻吩溶解于lml的二甲基亞砜中，然后用0.1mol/LPBS（pH7.0）再稀釋1：20，最后濃度為500μg/m1，溶液呈黃或淡橙色，保存4～10℃，可用幾個星期。取該溶液0.05ml置放于微量稀釋板凹孔中或小試管中，挑取被試菌落，制成濃厚懸液，與凹孔中基質(zhì)液混和，室溫10～30min，頭孢硝基噻吩由黃變成紅色為陽性，若顯色不明顯，觀察可延長6h.

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