酶標記抗體或抗原的制備的方法有哪些呢
酶標記抗體或抗原的制備的方法有哪些呢?快來跟著小編了解一下吧!
標記方法應符合:技術方法簡單、產(chǎn)率高,且重復性好;標記反應不影響酶和抗原或抗體的活性;酶標志物穩(wěn)定,應避免酶、抗體(抗原)以及酶標志物各自形成聚合物等。
1.戊二醛交聯(lián)法:同源雙功能交聯(lián)劑。
(1)一步法:連接AP。
①優(yōu)點:操作簡便、有效,重復性好。
②缺點:交聯(lián)時分子間比例不嚴格,大小不一,影響效果。
(2)二步法:連接HRP。
先將HRP與戊二醛作用,透析除去戊二醛,在pH9.5緩沖液中再與抗體作用而形成酶標抗體。
優(yōu)點:酶標志物質(zhì)量較均一,標記效率也較一步法高。
2.改良過碘酸鈉法
HRP標記抗體或抗原的最常用方法。
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