什么是堿性磷酸酶染色呢
什么是堿性磷酸酶染色呢?快來(lái)跟著小編了解一下吧!
(1)原理(偶氮偶聯(lián)法):血細(xì)胞內(nèi)的堿性磷酸酶在pH9.4~9.6的條件下將基質(zhì)液中的α-磷酸萘酚鈉水解,產(chǎn)生α-萘酚與重氮鹽偶聯(lián)形成不溶性灰黑色沉淀,定位于酶活性所在之處。
(2)結(jié)果判斷:陽(yáng)性結(jié)果為胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)灰褐色至深黑色顆粒狀或片狀沉淀:
①(-)無(wú)灰褐色沉淀,為0分。
②(+)胞質(zhì)出現(xiàn)灰褐色沉淀,為1分。
③(++)胞質(zhì)深褐色沉淀,為2分。
④(+++)胞質(zhì)中已基本充滿棕黑色顆粒狀沉淀,但密度較低,為3分。
⑤(++++)胞質(zhì)全被深黑色團(tuán)塊沉淀所充滿,密度高,甚至遮蓋胞核,為4分。
該染色結(jié)果計(jì)算比較特殊,算積分值。
(3)正常血細(xì)胞的染色反應(yīng)
1)堿性磷酸酶主要存在于成熟中性粒細(xì)胞,除巨噬細(xì)胞可呈陽(yáng)性反應(yīng)外,其他血細(xì)胞均呈陰性反應(yīng)。
2)成熟中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶積分值的計(jì)算:在油鏡下,計(jì)數(shù)100個(gè)成熟中性粒細(xì)胞(包括中性分葉核粒細(xì)胞和中性桿狀核粒細(xì)胞)。分別記錄其分級(jí)情況,全部陽(yáng)性反應(yīng)的細(xì)胞之和即為陽(yáng)性率,將所有陽(yáng)性反應(yīng)細(xì)胞均以“+”級(jí)表示后,計(jì)算其總積分值。
例:某患者計(jì)數(shù)100個(gè)成熟中性粒細(xì)胞,其結(jié)果如下:
反應(yīng)程度 | 細(xì)胞個(gè)數(shù) | 積分值 |
- | 10 | 0 |
+ | 20 | 20 |
++ | 40 | 80 |
+++ | 20 | 60 |
++++ | 10 | 40 |
100(個(gè)) | 200(分) | |
陽(yáng)性率為90%,積分值為200 |
(4)參考值:成熟中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶(NAP)的積分值為30~130。由于各實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)條件不同,正常值也有差異,應(yīng)建立本實(shí)驗(yàn)室的正常值。這里的正常值僅供參考。
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