雜交瘤技術(shù)有哪些呢？快來跟著小編了解一下吧！

（一）小鼠骨髓瘤細胞

1.細胞株穩(wěn)定，易于傳代培養(yǎng)。

2.細胞株自身不會產(chǎn)生免疫球蛋白或細胞因子。

3.該細胞是次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)化酶（HGPRT）或胸腺嘧啶激酶（TK）的缺陷株。

4.目前最常用的骨髓瘤細胞是NS-1和SP2/O細胞株。

（二）免疫脾細胞

選用與骨髓瘤細胞同源的BALB/c小鼠，鼠齡8～12周，體重約20g，雌雄均可，但必須分籠。免疫用抗原盡量提高其純度和活性，多用腹腔內(nèi)或皮內(nèi)多點注射法。如微量抗原，可脾臟內(nèi)直接注射進行免疫。

（三）細胞融合

PEG（聚乙二醇）有助于細胞融合。

（四）雜交瘤細胞的選擇性培養(yǎng)

將經(jīng)過融合的細胞置于含有次黃嘌呤、甲氨蝶呤和胸腺嘧啶核苷的HAT培養(yǎng)基中。

1.脾細胞：在一般培養(yǎng)基中不能生長繁殖。

2.骨髓瘤細胞：采用的小鼠骨髓瘤細胞都是HGPRT或TK代謝缺陷型細胞，在HAT培養(yǎng)基中不能增殖。

3.雜交瘤細胞：骨髓瘤細胞與脾細胞融合，獲得HGPRT，可以利用次黃嘌呤合成DNA，故可以存活。

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