免疫細(xì)胞的分離:
一、外周血單個核細(xì)胞的分離
外周血中單個核細(xì)胞(淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞)的比重與紅細(xì)胞、多核白細(xì)胞及血小板不同,介于1.075~1.090之間,紅細(xì)胞及粒細(xì)胞在1.092左右,血小板在1.030~1.035之間,因而可利用一種比重介于1.075~1.092之間而近于等滲的溶液作密度梯度離心,使一定比重的細(xì)胞按相應(yīng)密度梯度分布而加以分離醫(yī)`學(xué)教育網(wǎng)搜集整理。
以上可見,分離介質(zhì)是分離各類細(xì)胞的關(guān)鍵,對分離介質(zhì)的基本要求是:①對細(xì)胞無毒;②基本等滲;③不溶于血漿及分離物質(zhì);④有特定的比重。將2份6%聚蔗糖蒸餾水溶液與1份34%泛影葡胺生理鹽水溶液混合,其比重為1.077±0.002,可作為常規(guī)的淋巴細(xì)胞分離液,即Ficoll分離液。主要用于分離外周血中單個核細(xì)胞,是一種單次密度梯度離心分離法,其分布由上到下依次為:稀釋的血漿層、單個核細(xì)胞層、粒細(xì)胞層和紅細(xì)胞層。
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