方法名稱：

維生素B6的測定—高效液相色譜法

應用范圍：

本方法采用高效液相色譜法測定維生素B6（C8H10NO5P）的含量。

本方法適用于維生素B6。

方法原理：

供試品制成流動相溶液，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長291nm處檢測維生素B6吸收值，計算出其含量。

試劑：

1. 甲醇

2. 0.04%戊烷磺酸鈉溶液（用冰醋酸調(diào)節(jié)pH值至3.0）

3. 冰醋酸

儀器設備：

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按維生素B6峰計算不低于4000。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：0.04%戊烷磺酸鈉溶液 甲醇=85 15。

2.2 檢測波長：291nm

2.3 柱溫：室溫

試樣制備：

1. 稱取供試品

精密稱取本品適量。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取維生素B6對照品適量，同供試品配制，搖勻，即得。

3. 供試品溶液的制備

將供試品加流動相溶解并定量稀釋制成每1mL含有約0.1mg的溶液，搖勻，即得。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟：

分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各10μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長291nm處測定維生素B6的吸收值，計算出其含量醫(yī)`學教育網(wǎng)搜集整理。

參考文獻：

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.668。