為方便廣大考生復習,醫(yī)學教育網整理了臨床醫(yī)學檢驗技士考試關于B細胞功能的檢測的相關內容,以供參考。
1.空斑形成細胞(PFC)
檢測是體外檢測B細胞功能的一種方法。該法最早用于實驗動物的PFC測定。是以SRBC作為抗原免疫小鼠,從免疫小鼠脾臟分離淋巴細胞或直接用脾細胞,將其與高濃度SRBC混合于瓊脂中,經37℃,5%CO2溫育后,在補體參與下抗體形成細胞周圍的SRBC溶解而形成溶血小區(qū),即溶血空斑(plaque)。一個空斑代表一個抗體形成細胞,空斑的數(shù)量表示抗體形成細胞的多少。IgM參與本反應,固定補體能力強,可直接激活傳統(tǒng)途徑,導致SRBC溶解,稱直接法。若檢測其他類別免疫球蛋白的抗體形成細胞,需在試驗系統(tǒng)中加入相應的第二抗體才能使SRBC溶解形成空斑,稱間接空斑形成試驗。近年來,已應用SPA致敏的SRBC結合抗人球蛋白來檢測人的抗體形成細胞,此法稱SPA-SRBC溶血空斑試驗。在此檢測系統(tǒng)中加入抗人Ig,能與受檢細胞產生的Ig結合成復合物,并通過復合物中抗人IgFc段與致敏SRBC上的SPA結合,激活補體而使SRBC溶解。空斑形成細胞的檢測,有助于免疫應答動力學的研究和探討藥物對機體免疫狀態(tài)的影響。是目前研究B細胞抗體產生功能的重要手段。
2.定量溶血分光光度法(QHS)
該法又稱B細胞介導的紅細胞定量溶血分光光度法,是根據溶血空斑試驗的原理衍化而來,醫(yī)學教|育網搜集整理可用以測定由B細胞產生和分泌的抗體裂解紅細胞所釋放的血紅蛋白(以吸光值表示),從而反映機體的體液免疫功能。試驗時,將免疫的脾細胞與SRBC及新鮮豚鼠血清等體積混合,于37℃水浴1小時,離心后測上清吸光值,其與產生抗體的量成正比。
3.ELISA-空斑試驗(ELISA-plaque assay)
又稱酶聯(lián)免疫斑點試驗(ELISPOT)。該法與ELISA不同之處是,加入的待檢標本是細胞,而非可溶性物質;所使用的底物可形成不溶性終產物。ELISPOT不僅可應用于B細胞分泌抗體功能的測定,也能檢測分泌細胞因子的T細胞和巨噬細胞?,F(xiàn)已有應用該技術于計數(shù)類風濕因子分泌細胞的報道,但尚未在臨床推廣。