外科手術治療的成敗和手術中的無菌操作有著密切關系。參加手術的人員在手術過程中，必須嚴格遵守無菌操作規(guī)程，否則已建立的無菌環(huán)境、已滅菌的無菌物品，仍有受到污染和引起傷口感染的可能，有時可因此而使手術失敗，甚至危及病人生命。手術臺上的無菌原則，是整個手術的無菌術，術中如有違反無菌原則者，必須立即糾正。在整個手術進程中，必須按以下規(guī)則進行：

　　1.嚴格區(qū)分無菌區(qū)和非無菌區(qū)。穿手術衣戴手套后，臍平面以上，乳腺平面以下，兩側腋前線至胸前區(qū)為無菌區(qū)；背部，腰以下和肩以上都應視為非無菌區(qū)，不能接觸。

　　2.在手術過程中只允許在無菌區(qū)操作，接觸非無菌區(qū)即認為被污染。 不可在手術人員背后傳遞器械及手術用品，手術人員也不可伸手自取。墜落到手術臺平面以下的器械物品均視為有菌。如器械越過有菌區(qū)，應重新滅菌。

　　3.手術切口前，戴滅菌手套的手，不要隨意觸摸病人消毒水平的皮膚，觸時應墊有滅菌紗布，用完丟掉。切口邊緣要以干紗布墊或無菌巾覆蓋，并用巾鉗或縫線固定于皮下，切開皮膚所用的刀、鑷，不能再用于深部應更換。（如術前皮膚加貼無菌薄膜者能達到相同的目的可例外）。

　　4.術中同側手術人員如需調換位置，一人應先退后一步，轉過身背對背地進行交換，以防觸及對方背部有菌區(qū)。但繞過器械臺時，應面對器械臺以減少污染。

　　5.無菌單因水、膿、血等浸透，已失去無菌隔離作用，應加蓋無菌單覆蓋。衣袖被浸濕或污染時應更換手術衣或加戴無菌袖套。手套破損或被污染，應立即更換。

　　6.切開空腔臟器（闌尾、子宮、胃腸、膽道）前，應以紗布保護好周圍組織，被污染的器械、紗布應另放一彎盤內，以防止或減少污染。相關部分操作完畢后，所用器械不能再用于處理其它組織。

　　7.如因故手術需要暫停進行時（如等待病理冰凍切片報告），切口應用無菌巾覆蓋。術中進行X線拍片、造影或病人躁動時，應注意保護無菌區(qū)不被污染。

　　8.術中保持安靜，不可閑談與大聲喧嘩。必要的談話或偶有咳嗽時，不要對向手術區(qū)，以防飛沫污染?？谡殖睗窈笠鼡Q，出汗較多時，應將頭偏向于一側，由其它人代為擦去，以免汗液落于手術區(qū)內。

　　9.兩臺手術同時進行，如手術已開始，則不應互相拿用器械、用品。

　　10.手術進行中，如需增加器械、物品，應由巡回士用滅菌鉗夾持，傳送時手不能靠近器械臺。

　　11.手術開始前要清點器械、敷料，手術結束時，檢查胸、腹等體腔，待核對器械、敷料數(shù)無誤后，才能關閉切口，以免異物遺留體腔內，產(chǎn)生嚴重后果。

　　12.切開皮膚及縫合皮膚前應用70％酒精涂擦消毒皮膚一次?？p合皮膚后再用70％酒精涂擦一遍，最后覆蓋無菌敷料。

　　13.參觀人員離無菌區(qū)不可太近（應保持20厘米以外的距離），也不可站得過高，盡量減少在室內走動和說話，以減少污染機會。有條件的醫(yī)院應設專門的隔離看臺，或采用網(wǎng)絡電視教學。