1.檢測原理
(1)清亮或微渾的腦脊液標本,可以直接計數(shù)細胞總數(shù),或稀釋后再直接計數(shù),將結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。
?。?)可采用直接計數(shù)法計數(shù)白細胞,或稀釋后再直接計數(shù),將結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。
?。?)白細胞直接計數(shù)后,在高倍鏡下根據(jù)白細胞形態(tài)特征進行分類計數(shù)。也可采用Wright染色后,油鏡下分類計數(shù)。
2.方法學評價
細胞總數(shù)計數(shù)和分類計數(shù)常用顯微鏡計數(shù)法。白細胞直接分類法簡單、快速,但準確性差,尤其是陳舊性標本,細胞變形,分類困難,誤差較大。涂片染色分類法細胞分類詳細,結(jié)果準確可靠,尤其是可以發(fā)現(xiàn)異常細胞如腫瘤細胞,故推薦使用此法。該法不足之處是操作較復雜,費時。
腦脊液細胞收集有幾種方法,離心涂片法常影響細胞形態(tài)及分類。目前,玻片離心沉淀法和細胞室沉淀法已用于腦脊液細胞的濃縮和收集,其優(yōu)點是收集的細胞形態(tài)完整(尤其是細胞室沉淀法),分類效果好。另外,玻片離心沉淀法陽性率高。
血細胞分析儀進行腦脊液計數(shù)和白細胞分類,此法醫(yī)|學教育網(wǎng)搜集整理簡單、快速,可以自動化。但病理性、陳舊性標本中的組織、細胞的碎片和殘骸以及細胞變形等都可以影響細胞分類和計數(shù),故重復性、可靠性有待進一步探討。另外,蛋白質(zhì)含量高,尤其有凝塊的腦脊液標本容易使儀器發(fā)生堵孔現(xiàn)象,故不推薦使用。
3.質(zhì)量控制
?。?)細胞計數(shù):①標本采集后應(yīng)在1h內(nèi)進行細胞計數(shù)。標本放置過久,細胞可能凝集成團或被破壞,影響計數(shù)結(jié)果。②標本必須混勻后方可進行檢查,否則會影響計數(shù)結(jié)果。
?。?)校正與鑒別:①因穿刺損傷血管,引起血性腦脊液,白細胞計數(shù)結(jié)果必須校正,以消除因出血帶來的白細胞。②細胞計數(shù)時,應(yīng)注意紅細胞、白細胞與新生隱球菌的鑒別。新生隱球菌不溶于乙酸,加優(yōu)質(zhì)墨汁后可見未染色的莢膜;白細胞也不溶于乙酸,加酸后細胞核和細胞質(zhì)更加明顯;紅細胞加酸后溶解。
?。?)檢查方法:白細胞直接計數(shù)法的試管與吸管中的冰乙酸要盡量去盡,否則可使結(jié)果偏低。若標本陳舊、細胞變形時,白細胞直接分類法誤差大,可采用涂片染色分類法分類計數(shù)。
?。?)染色固定:涂片染色分類計數(shù)時,離心速度不能太快,否則會影響細胞形態(tài),可采用玻片離心法、沉淀室法收集細胞。涂片固定時間不能太長,更不能高溫固定,以免使細胞皺縮,影響檢驗結(jié)果。
4.參考值
(1)無紅細胞。
(2)白細胞極少,成人:(0~8)×106/L,兒童:(1~15)×106/L,主要為單個核細胞,淋巴細胞與單核細胞之比為7:3.
5.臨床意義
腦脊液白細胞達(10~50)×106/L為輕度增高,(50~100)×106/L為中度增高,大于200×106/L為顯著增高。腦脊液中血細胞增高的程度不同期臨床意義也不同。