1.分離培養(yǎng)：通常由正常無菌部位采取的標(biāo)本接種血平板，置于空氣或含5%～10%CO₂的氣缸中培養(yǎng)，大部分細(xì)菌可于24～48h生長(zhǎng)良好。若原始培養(yǎng)為陰性，但據(jù)鏡檢結(jié)果和臨床信息提示可能有病原菌存在，則應(yīng)再采集大量標(biāo)本，離心濃縮或溶解離心法處理，取沉淀接種營(yíng)養(yǎng)豐富的需氧或厭氧培養(yǎng)基來培養(yǎng)。

　　對(duì)于存在正常菌群部位采集的標(biāo)本，分離時(shí)應(yīng)采用選擇培養(yǎng)基以利于病原菌生長(zhǎng)，也可加某些抗生素抑制污染菌的生長(zhǎng)。對(duì)于某些感染標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌，如尿路感染的尿液中檢出大腸埃希菌，可能是病原菌，也可能是污染菌或正常菌群，其臨床意義的確定有賴于定量培養(yǎng)法。即取一定量的標(biāo)本如液體標(biāo)本用液體培養(yǎng)基作一系列稀釋；組織標(biāo)本稱量后制成懸液，并稀釋成10^-1，10^-2，10^-3等，分別取0.1ml涂布于血瓊脂平板或傾注培養(yǎng)，35℃24h后計(jì)算每克標(biāo)本所含細(xì)菌數(shù)醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理。

　　2.鑒定：分離出的細(xì)菌一般應(yīng)經(jīng)過細(xì)菌形態(tài)、菌落特點(diǎn)、生化反應(yīng)、血清學(xué)試驗(yàn)、動(dòng)物接種等鑒定。目前尚有某些微量鑒定系統(tǒng)，其鑒定快速、簡(jiǎn)便，值得推廣。如用于鑒定腸桿菌科的20E，鑒定非發(fā)酵菌的20NE及鑒定厭氧菌的20A等。

　　3.體外純菌藥物敏感性試驗(yàn)：常用方法包括抑菌試驗(yàn)、殺菌試驗(yàn)、聯(lián)合藥敏試驗(yàn)和檢測(cè)細(xì)菌產(chǎn)生的抗生素滅活酶等。