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淋病奈瑟菌的實驗室檢查及其診斷

2009-06-15 11:41 來源:
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  (1) 涂片檢查:取患者尿道分泌物或?qū)m頸分泌物,作革蘭氏染色,在多形核白細(xì)胞內(nèi)找到革蘭氏陰性雙球菌。涂片對有大量膿性分泌物的單純淋菌性前尿道炎患者,此法陽性率在90%左右,可以初步診斷。女性宮頸分泌物中雜菌多,敏感性和特異性較差,陽性率僅為50-60%,且有假陽性,因此世界衛(wèi)生組織推薦用培養(yǎng)法檢查女病人。慢性淋病由于分泌物中淋球菌較少,陽性率低,因此要取前列腺按摩液,以提高檢出率。

  咽部涂片發(fā)現(xiàn)革蘭氏陰性雙球菌不能診斷淋病,因為其他奈瑟菌屬在咽部是正常的菌群。另外對癥狀不典型的涂片陽性應(yīng)作進(jìn)一步檢查。

 ?。?)培養(yǎng)檢查:淋球菌培養(yǎng)是診斷的重要佐證,培養(yǎng)法對癥狀很輕或無癥狀的男性、女性病人都是較敏感的方法,只要培養(yǎng)陽性就可確診,在基因診斷問世以前,培養(yǎng)是世界衛(wèi)生組織推薦的篩選淋病的唯一方法。

  目前國外推薦選擇培養(yǎng)基有改良的Thayer-Martin(TM)培養(yǎng)基和New York City(NYC)培養(yǎng)基。國內(nèi)采用巧克力瓊脂或血瓊脂培養(yǎng)基,均含有抗生素,可選擇地抑制許多其他細(xì)菌生長。在36℃,70%濕度,含5%-10%CO2(燭缸)環(huán)境中培養(yǎng),24-48小時觀察結(jié)果。培養(yǎng)后還需進(jìn)行菌落形態(tài),革蘭氏染色,氧化酶試驗和糖發(fā)酵試驗等鑒定。培養(yǎng)陽性率男性80%-95%,女性80-90%.培養(yǎng)后需根據(jù)菌落形態(tài)、革蘭染色、氧化酶試驗和糖發(fā)酵試驗做出鑒定。培養(yǎng)陽性率男性為80%~95%,女性為80%~90%。

 ?。?)抗原檢測

  1.固相酶免疫試驗(EIA):可用來檢測臨床標(biāo)本中的淋球菌抗原,在流行率很高的地區(qū)而又不能作培養(yǎng)或標(biāo)本需長時間遠(yuǎn)送時使用,可以在婦女人群中用來診斷淋球菌感染。

  2.直接免疫熒光試驗:通過檢測淋球菌外膜蛋白I的單克隆抗體作直接免疫熒光試驗。但目前在男女二性標(biāo)本的敏感不高,特異性差,加之實驗人員的判斷水平,故該實驗尚不能推薦用來診斷淋球菌感染。

 ?。?)基因診斷

  1.淋球菌的基因探針診斷:淋球菌的基因探針診斷,所用的探針有:質(zhì)粒DNA探針,染色體基因探針和rRNA基因探針。

  2.淋球菌的基因擴(kuò)增檢測 PCR技術(shù)和連接酶鏈反應(yīng)的出現(xiàn)進(jìn)一步提高了檢測淋球菌的靈敏性,它具有快速、靈敏、特異、簡便的優(yōu)點,可以直接檢測臨床標(biāo)本中極微量的病原體。

 ?。?)藥敏試驗 對培養(yǎng)陽性者可進(jìn)一步用紙片擴(kuò)散法做藥敏試驗,或用瓊脂平皿稀釋法測定藥物最小抑菌濃度(MIC),以及用紙片酸度定量法檢測β-內(nèi)酰胺酶(使用Whatman I號濾紙PP-NG菌株能使其顏色由藍(lán)變黃,陽性為PPNG,陰性為N-PPNG),以確定淋球菌對抗生素的敏感性,合理選擇用藥。

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