臨床微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室接到標(biāo)本后應(yīng)立即進(jìn)行微生物學(xué)檢驗(yàn)。主要包括直接鏡檢、檢測(cè)特異性抗原或病原體成分、進(jìn)行分離培養(yǎng)和鑒定、體外藥敏試驗(yàn)等。
(一)直接鏡檢
1.初步診斷;
2.指導(dǎo)進(jìn)一步檢出步驟和鑒定方法的選擇;
3.評(píng)價(jià)標(biāo)本的質(zhì)量。
(二)快速診斷
快速檢測(cè)病原體成分主要是指特異性抗原和核酸檢測(cè)。
特異性抗原檢測(cè)包括免疫熒光技術(shù)、膠乳凝集試驗(yàn)、酶免疫技術(shù)、對(duì)流免疫電泳、化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定等。(免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù))
核酸檢測(cè)包括核酸探針雜交、PCR技術(shù)。(分子生物學(xué)檢驗(yàn)技術(shù))
其他快速檢測(cè)法還有氣-液相色譜法、化學(xué)發(fā)光、生物發(fā)光測(cè)定法和基因或蛋白微型陣列芯片技術(shù)等。
(三)直接藥敏試驗(yàn)
鑒定結(jié)果快,但結(jié)果不明確,故分離出純培養(yǎng)物后應(yīng)再作體外藥物敏感試驗(yàn)。
(四)常規(guī)檢驗(yàn)
1.分離培養(yǎng):
通常由正常無(wú)菌部位采取的標(biāo)本接種血平板,置于空氣或含5%~10%CO2的氣缸中培養(yǎng),大部分細(xì)菌可于24~48h生長(zhǎng)良好。若原始培養(yǎng)為陰性,但據(jù)鏡檢結(jié)果和臨床信息提示可能有病原菌存在,則應(yīng)再采集大量標(biāo)本,離心濃縮或溶解離心法處理,取沉淀接種營(yíng)養(yǎng)豐富的需氧或厭氧培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)。
對(duì)于存在正常菌群部位采集的標(biāo)本,分離時(shí)應(yīng)采用選擇培養(yǎng)基以利于病原菌生長(zhǎng),也可加某些抗生素抑制污染菌的生長(zhǎng)。對(duì)于某些感染標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌,如尿路感染的尿液中檢出大腸埃希菌,可能是病原菌,也可能是污染菌或正常菌群,其臨床意義的確定有賴于定量培養(yǎng)法。
2.鑒定:分離出的細(xì)菌一般應(yīng)經(jīng)過(guò)細(xì)菌形態(tài)、菌落特點(diǎn)、生化反應(yīng)、血清學(xué)試驗(yàn)、動(dòng)物接種等鑒定。目前尚有某些微量鑒定系統(tǒng),其鑒定快速、簡(jiǎn)便,值得推廣。如用于鑒定腸桿菌科的20E,鑒定非發(fā)酵菌的20NE及鑒定厭氧菌的20A等。
3.體外純菌藥物敏感性試驗(yàn):常用方法包括抑菌試驗(yàn)、殺菌試驗(yàn)、醫(yī)學(xué)。教育網(wǎng)整理聯(lián)合藥敏試驗(yàn)和檢測(cè)細(xì)菌產(chǎn)生的抗生素滅活酶等。
(五)報(bào)告
?、僦苯隅R檢要求2h報(bào)告,說(shuō)明標(biāo)本是否合格,發(fā)現(xiàn)微生物情況和特點(diǎn);
?、诔醪借b定和直接藥敏結(jié)果于24h或次晨報(bào)告,報(bào)告可能的病原菌和直接藥敏結(jié)果;
?、圩詈箬b定和細(xì)菌藥敏結(jié)果一般不超過(guò)3天,還規(guī)定除血培養(yǎng)外,所有送檢標(biāo)本必須在24h內(nèi)預(yù)報(bào)。
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