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一、基本原理
紫外--可見分光光度法:是根據(jù)物質(zhì)分子對(duì)波長(zhǎng)為200-760nm這一范圍的電磁波的吸收特性所建立起來(lái)的一種定性、定量和結(jié)構(gòu)分析方法。操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確度高、重現(xiàn)性好。波長(zhǎng)長(zhǎng)(頻率小)的光線能量小,波長(zhǎng)短(頻率大)的光線能量大。 100nm、200nm、400nm、800nm、400um、1m通指X-射線、紫外區(qū)、可見區(qū)、紅外區(qū)、微波區(qū)、無(wú)線電波區(qū)
Beer-lambert定律: A=Elc
A--吸收度
E-吸收系數(shù)
l ---液層厚度
c---溶液濃度吸收度濃度與厚度的關(guān)系。是吸收光度法的基本定律,重要前提是單色光。
摩爾吸收系數(shù):指在一定波長(zhǎng)下,溶液濃度為1mol/L , 厚度為1cm時(shí)的吸收度,用 表示。
百分吸收系數(shù):指在一定波長(zhǎng)下,溶液濃度為1%(W/V) , 厚度為1cm時(shí)的吸收度,用 表示。
影響B(tài)eer定律因素:化學(xué)因素,光學(xué)因素
二、紫外--可見分光光度計(jì):
主要部件:
1、 光源:要求光譜的光源,
2、 氫燈和鎢燈(350nm)
3、 單色器:進(jìn)口狹縫、準(zhǔn)直鏡、色散元件(棱鏡和光柵)、聚焦透鏡和出口狹縫組成。
4、 吸收池:用光學(xué)玻璃制成的吸收池,
5、 只能用于可見光區(qū)。用熔融石英(氧化硅),
6、 可見紫外光區(qū)。
7、 檢測(cè)器:光電池:(硒光電池:用于可見光;硅光電池:紫外可見光) 內(nèi)阻小,光電管:內(nèi)阻高,電流易放大 。
8、 易疲勞。
9、 訊號(hào)處理和顯示器
三、定性與定量方法:
(一)、定性鑒別:是多數(shù)有機(jī)化合物具有吸收光譜特征。一般用對(duì)比法。
1、對(duì)比吸收光譜特征數(shù)據(jù)
2、對(duì)比吸收度(或吸收系數(shù))比值
3、對(duì)比吸收光譜的一致性
(二)、純度檢查:雜質(zhì)檢查與雜質(zhì)限量檢測(cè)
(三)、含量測(cè)定:
1、吸收系數(shù)法
2、標(biāo)準(zhǔn)曲線法
3、對(duì)照法
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