臨床醫(yī)學檢驗技術(shù)輔導(dǎo)資料：雜交瘤技術(shù)基本原理

單克隆是指利用在細胞融合基礎(chǔ)上的B細胞雜交瘤技術(shù)。

雜交瘤技術(shù)的基本原理是通過融合兩種細胞而同時保持兩者的主要特征。這兩種細胞分別是經(jīng)抗原免疫的小鼠脾細胞和小鼠骨髓瘤細胞。被特異性抗原免疫的小鼠脾細胞（B淋巴細胞）的主要特征是它的抗體分泌功能，但不能在體外連續(xù)培養(yǎng)，小鼠骨髓瘤細胞則可在培養(yǎng)條件下無限分裂、增殖，即具有所謂永生性。在選擇培養(yǎng)基的作用下，只有B細胞與骨髓瘤細胞融合的雜交細胞才能具有持續(xù)培養(yǎng)的能力，形成同時具備抗體分泌功能和保持細胞永生性兩種特征的細胞克隆。

一、B細胞雜交瘤技術(shù)

二、T細胞雜交瘤

三、陽性雜交瘤細胞的克隆化培養(yǎng)雜交瘤細胞形成后的初期很不穩(wěn)定，為確保單克隆抗體的專一性及避免其他陰性細胞對其生長影響，必須將陽性雜交瘤細胞進行單細胞分離培養(yǎng)，產(chǎn)生單克隆雜交瘤細胞，經(jīng)2～3次檢測均為陽性的雜交瘤單個細胞，才能進行克隆化培養(yǎng)。

克隆化培養(yǎng)后的陽性雜交瘤細胞應(yīng)及時凍存，最好保存在-196℃液氮中。