2021年公衛(wèi)執(zhí)業(yè)醫(yī)師如何復(fù)習(xí)？考什么？相信是廣大考生關(guān)心的事情，醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編為幫助大家復(fù)習(xí)，特整理了“公衛(wèi)執(zhí)業(yè)醫(yī)師重組DNA技術(shù)高頻考點(diǎn)：限制內(nèi)切酶”，希望對(duì)大家復(fù)習(xí)有所幫助。

重組DNA技術(shù)　　第1講 重組DNA技術(shù)

【考頻指數(shù)】★★

【考點(diǎn)精講】

1.重組：在接合、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)或轉(zhuǎn)座過(guò)程中，不同DNA分子間發(fā)生的共價(jià)連接。

（1）接合作用：質(zhì)粒DNA從一個(gè)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至另一細(xì)胞。

（2）轉(zhuǎn)化作用：將外源DNA分子引入宿主細(xì)胞，使細(xì)胞或培養(yǎng)的受體細(xì)胞獲得新的遺傳表型。

（3）轉(zhuǎn)導(dǎo)作用：從被感染的細(xì)胞（供體）釋放出來(lái)的病毒再次感染另一細(xì)胞（受體）時(shí)，發(fā)生供體細(xì)胞與受體細(xì)胞之間的DNA轉(zhuǎn)移。

重要的工具酶：限制性內(nèi)切核酸酶：DNA序列特異的內(nèi)切酶識(shí)別特異DNA序列，并在識(shí)別位點(diǎn)或其周圍切割雙鏈DNA的一類內(nèi)切酶。

2.基本原理：獲取目的基因→外源基因與載體連接→重組DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞→篩選重組體→克隆基因的表達(dá)，獲得所需蛋白。

3.醫(yī)學(xué)應(yīng)用：①基因治療，向有功能缺陷的細(xì)胞導(dǎo)入具有相應(yīng)功能的外源基因，以糾正或補(bǔ)償其基因缺陷，從而達(dá)到治療目的；②發(fā)展新藥物；③基因（DNA）診斷，利用分子生物學(xué)及分子遺傳學(xué)的技術(shù)和原理，在DNA水平分析、鑒定遺傳性疾病所涉及基因的置換、缺失或插入等突變；④疾病相關(guān)基因的發(fā)現(xiàn)。

【進(jìn)階攻略】基因重組要掌握幾種重組形式以及重要的工具酶，相關(guān)醫(yī)學(xué)應(yīng)用要了解。

【知識(shí)點(diǎn)隨手練】

一、A1型選擇題

1.基因重組不包括

A.轉(zhuǎn)化

B.轉(zhuǎn)換

C.接合

D.轉(zhuǎn)導(dǎo)

E.轉(zhuǎn)座

2.有關(guān)限制內(nèi)切酶的敘述，正確的是

A.由噬菌體提取而得

B.可將單鏈DNA隨機(jī)切開(kāi)

C.可將雙鏈DNA特異切開(kāi)

D.可將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)

E.催化DNA的甲基化

3.可識(shí)別并切割DNA分子內(nèi)特異序列的酶稱為

A.限制性外切核酸酶

B.限制性內(nèi)切核酸酶

C.非限制性外切核酸酶

D.非限制性內(nèi)切核酸酶

E.DNA酶

【知識(shí)點(diǎn)隨手練參考答案及解析】

一、A1型選擇題

1.【答案及解析】B。基因重組只包括：接合、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)或轉(zhuǎn)座。而基因轉(zhuǎn)換特指減數(shù)分裂過(guò)程中兩條染色體非同源DNA片段的轉(zhuǎn)移，不屬于基因重組。

2.【答案及解析】C。限制性內(nèi)切酶能分裂DNA分子在一限定數(shù)目的專一部位上。它能識(shí)別外源DNA并將其降解。

3.【答案及解析】B。所謂限制性內(nèi)切核酸酶就是識(shí)別DNA的特異序列，并在識(shí)別位點(diǎn)或其周圍切割雙鏈DNA的一類內(nèi)切酶。通常不用非限制性內(nèi)切核酸酶或非限制性外切核酸酶一詞。DNA酶是一種催化DNA水解的非特異性酶。

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