斑點免疫滲濾試驗的原理是什么?方法類型是什么?
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用于檢測各種傳染病的抗體和腫瘤標(biāo)記物等,以及用于檢測尿液HCG的“金標(biāo)”早孕診斷試劑。
(一)原理:將抗原或抗體點加在固相載體硝酸纖維素薄膜上,將膜貼于吸水材料上,依次在膜上滴加標(biāo)本、免疫膠體金及洗滌液等試劑進行抗體或抗原反應(yīng),過量試劑很快滲入吸水材料中。
抗原抗體反應(yīng)后,形成大分子膠體金復(fù)合物,從而使陽性結(jié)果在膜上呈現(xiàn)紅色斑點。液體通過微孔濾膜時,滲濾液中的抗原或抗體與膜上的抗體或抗原相接觸,起到親和層析的濃縮,達到快速檢測的目的,同時洗滌液的滲入在短時間內(nèi)即可達到徹底洗滌的目的,簡化了操作步驟。
(二)方法類型
1.雙抗體夾心法測抗原:用抗體結(jié)合在微孔濾膜中央,滴加待檢標(biāo)本,抗原抗體反應(yīng)后,滴加金標(biāo)抗體,加洗滌液洗滌后,陽性者即在膜中央呈紅色斑點。
2.間接法測特異性抗體:用抗原包被在微孔濾膜上,滴加待測標(biāo)本,滴加洗滌液洗滌后,滴加金標(biāo)抗抗體,加洗滌液洗滌后,陽性者即在膜中央呈紅色斑點。該法由于血清標(biāo)本中非目的IgG的干擾,易導(dǎo)致假陽性結(jié)果。
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