精子與卵結合除精子濃度和數(shù)量因素外，還必須具備妝好的運動功能和對宮頸粘液、卵細胞放射冠、透明帶及卵細胞膜的穿透力。精子穿透力是評價精子功能的主要指標之一，據(jù)報告，約18%精液常規(guī)檢查正常的精子不能穿透宮頸粘液，所以檢查精子功能對研究精子在體內(nèi)運行，受精能力發(fā)及男性不育的原因有重要價值，其常用的試驗有：

1、體內(nèi)穿透試驗：（in vivo penetration test）又稱性交后試驗。檢查于排卵期性交后一定時間內(nèi)宮頸中粘液活精子數(shù)量，存活率及活運動力，以評價精子對宮頸粘液的穿透能力，正常人可見>50個HPF有正常活動能力的精子。當宮頸粘液異?；蛴锌咕涌贵w時，精子體內(nèi)穿透能力減弱或喪失。其結果還受雌激素分泌狀況等多種因素影響。

2、體外穿透試驗（in vitro，penetration test）

（1）簡化玻片試驗：將一滴宮頸粘液置載正玻片上，用蓋玻片鋪平，兩片之間的厚度用哇化的玻璃珠控制，在載玻片兩側各滴一滴精液，使懷蓋玻片邊緣接觸，借毛細作用將精液移向蓋玻片，使宮頸粘液與精液之間現(xiàn)一清晰接觸界面，37攝氏度卵育30分鐘。精子在接觸界面處形成一指狀突起伸入粘液，精子穿過指狀突起進入精液，然后呈扇形散開運動。本試驗的觀察指標為：①粗精了子穿透并有90%以上具有明確直線運動的活動精子時為正常結果；②精子穿透粘液，但離開粘液與沮液接觸面<500μm為較差；③精子穿透粘液，但很快失活或僅作擺動力為異常；④精子未穿透與精液的接觸界面，精子接觸界面的精液側凝集為異常結果。

本試驗常帶來有一定的主觀性，因為在平面玻璃上使精液粘液觸界面的大小和形狀完全標準化是不可能和，因為而吸能定性評價精子粘液的相互作用。

（2）精子宮頸粘液接觸（sperm-cervical mucus contact，SCMC）試驗：本試驗的目的是檢驗精液和燥頸內(nèi)是否存在損害精子運動功能的ASAB及其損害程度，精子與近排卵期的宮頸粘液等量混合，富強溫下作用30min，鏡下計數(shù)擺動的精子，求出擺動精子的出現(xiàn)率（%），以單獨的精液滴鏡檢作為精子活力的對照，擺動精子的出現(xiàn)率越高，意味著精子不能穿過宮頸粘液。說吸ASAB對精子運動功能的損害越重，見表11-1.

表11-1 ASAB對精子運動功能損害

玻片試驗與SCMC試驗陽性者可用其它供者的精液或燥頸粘液分別進行交叉試驗，以利于判斷ASAB的來源是清液或燥頸粘液。

（3）無透明帶倉鼠卵-精子穿透試驗（Zone free hamstar egg sperm penetration test，ZFHESPT）簡稱精子倉鼠卵穿透試驗是一種極為嚴格的生物學試驗，技術復雜，影響因素多。若能加強質(zhì)量控制，再加上其它客觀檢查如精子活力等，可作為測定功能和基礎。

其方法將精子于BWW培養(yǎng)液中經(jīng)37攝氏度獲能，再與用胰蛋白酶外理去除透明帶的倉鼠混合繼續(xù)孵育完成受精過種程。然后以相差顯微鏡檢查，計數(shù)卵子受精率和受精指數(shù)。

受精率（%）=受精卵數(shù)/卵細胞總數(shù)×100%

由于卵細胞已去除透明帶一個卵細胞可被多個精子穿透。FI為穿透卵細胞的精子總數(shù)與卵細胞總數(shù)之比，從整體上反映精子穿透力與項體反應。FI越高說明精子受精能力越強。