革蘭氏染色操作流程：

革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟，具體操作方法是：

（1）載玻片固定。在無菌操作條件下，用接種環(huán)挑取少量細菌于干凈的載玻片上涂布均勻，在火焰上加熱以殺死菌種并使其粘附固定。

（2）草酸銨結晶紫染1分鐘。

（3）自來水沖洗，去掉浮色。

（4）用碘-碘化鉀溶液媒染1分鐘，傾去多余溶液。

（5）用中性脫色劑如乙醇（95%）或丙酮酸脫色30秒，革蘭氏陽性菌不被褪色而呈紫色，革蘭氏陰性菌被褪色而呈無色。酒精脫色為整個流程最關鍵的一步。

（6）用蕃紅染液或者沙黃復染30秒，革蘭氏陽性菌仍呈紫色，革蘭氏陰性菌則呈現(xiàn)紅色醫(yī)|學教育網(wǎng)整理。革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌即被區(qū)別開。