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淋巴結(jié)型黑熱病實(shí)驗(yàn)診斷

2015-12-18 09:55 來源:
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淋巴結(jié)型黑熱?。捍诵突颊叩奶卣魇菬o黑熱病病史,局部淋巴結(jié)腫大,大小不一,位較表淺,無壓痛,無紅腫,嗜酸性粒細(xì)胞增多。淋巴結(jié)活檢可在類上皮細(xì)胞內(nèi)查見無鞭毛體。

實(shí)驗(yàn)診斷

1.病原檢查 常用的方法有:

⑴穿刺檢查:

1)涂片法:以骨髓穿刺物作涂片、染色,鏡檢。此法最為常用,原蟲檢出率為80%~90%.淋巴結(jié)穿刺應(yīng)選取表淺、腫大者,檢出率為46%~87%.也可做淋巴結(jié)活檢。脾穿刺檢出率較高,可達(dá)90.6%~99.3%,但不安全,少用。

2)培養(yǎng)法:將上述穿刺物接種于NNN培養(yǎng)基,置22~25℃溫箱內(nèi)。經(jīng)一周,若培養(yǎng)物中查見活動(dòng)活潑的前鞭毛體,則判為陽性結(jié)果。操作及培養(yǎng)過程應(yīng)嚴(yán)格注意無菌。

3)動(dòng)物接種法:醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng)搜集整理穿刺物接種于易感動(dòng)物(如地鼠、BALB/c小鼠等),1~2個(gè)月后取肝、脾作印片或涂片,瑞氏染液染色,鏡檢。

⑵皮膚活組織檢查:在皮膚結(jié)節(jié)處用消毒針頭刺破皮膚,取少許組織液,或用手術(shù)刀亂取少許組織作涂片,染色,鏡檢。

2.免疫診斷法

⑴檢測血清抗體:如酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、間接血凝試驗(yàn)(IHA)、對流免疫電泳(CIE)、間接熒光試驗(yàn)(IF)、直接凝集試驗(yàn)等,陽性率高,假陽性率也較高。近年來,用分子生物學(xué)方法獲得純抗原,降低了假陽性率。

⑵檢測血清循環(huán)抗原:單克隆抗體抗原斑點(diǎn)試驗(yàn)(McAb-AST)用于診斷黑熱病,陽性率高,敏感性、特異性、重復(fù)性均較好,僅需微量血清即可,還可用于療效評價(jià)。

3.分子生物學(xué)方法 近年來,用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)及DNA探針技術(shù)檢測黑熱病取得較好的效果,敏感性、特異性高,但操作較復(fù)雜,目前未能普遍推廣。

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