本世紀(jì)初Ehrilich曾提出用抗體導(dǎo)向治療腫瘤的設(shè)想，并稱之為魔彈。近一個(gè)世紀(jì)來(lái)，人們不斷努力，反復(fù)實(shí)驗(yàn)，但這一設(shè)想一直沒有很發(fā)實(shí)現(xiàn)。自1976年單克隆抗體技術(shù)問世以來(lái)，人們又燃起了應(yīng)用魔彈治療腫瘤的希望，理由是抗腫瘤單克隆抗體更加特異，抗原決定簇明確，可以大量生產(chǎn)，可能更適合于導(dǎo)向治療。進(jìn)入八十年代，我國(guó)就有許多實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行胃癌單克隆抗體的制備工作，是很艱苦的工作，不一定能堅(jiān)持下來(lái)。但是有些實(shí)驗(yàn)室從胃癌單克隆抗體的制備，到最后用于臨床診斷和治療，通過不斷努力，做出了很好的成績(jī)。若要實(shí)現(xiàn)腫瘤的導(dǎo)向治療，而且卓有成效，必須經(jīng)以下幾個(gè)關(guān)鍵步驟。

　　單克隆抗體的制備

　　目前單克隆抗體的制備多采取細(xì)胞融合的方法。國(guó)內(nèi)外產(chǎn)生胃癌單克隆抗體也是采取這個(gè)辦法。但要得到特異性好，效價(jià)高及親合力強(qiáng)的抗體，還必須采取許多措施。首先在選擇抗原上下功夫。避免單純用細(xì)胞系，因?yàn)榧?xì)胞系經(jīng)過長(zhǎng)期培養(yǎng)總要丟掉某些抗原，而采用新鮮標(biāo)本可以彌補(bǔ)這個(gè)問題。他們用手術(shù)切除的新胃癌標(biāo)本結(jié)合細(xì)胞系，原發(fā)病灶的細(xì)胞與轉(zhuǎn)移病灶的細(xì)胞并用，這樣容易得到不同的抗原決定簇的單克隆抗體，因而得到的MG系列有較多的類型。同時(shí)他們制備篩選了大量抗體，從幾十個(gè)雜交瘤細(xì)胞中精選出來(lái)幾株高效價(jià)，高親合力的，穩(wěn)定分泌的細(xì)胞株，組成MG系列。

　　第二個(gè)必要的措施是要選擇一種好的篩選抗體的方法。常用的篩選辦法是酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）及免疫組織化學(xué)的方法。從目前來(lái)看，以后者為好，它的優(yōu)點(diǎn)是組織切片中抗原成分很復(fù)雜，抗體與何種細(xì)胞成分反應(yīng)，一旦了然，如胃癌單克隆抗體，只應(yīng)同胃癌細(xì)胞反應(yīng)，若是其它細(xì)胞成分也反應(yīng)，如果不是非特異染色，就是抗原成分交叉，即有共同抗原?？梢詫⒎翘禺惾旧徒徊娣磻?yīng)的抗體丟掉，只留下較特異的抗體，所以用免疫組化篩選的效果全面而徹底，得到的信息多。在免疫組織化學(xué)的方法中，以ABC法比較敏感，即使反應(yīng)較弱的抗體也能顯示出來(lái)。免疫熒光間接法，用起來(lái)也很方便，但敏感性差一些，兩者都能節(jié)省時(shí)間。在篩選時(shí)還有一個(gè)問題城要注意，就是石蠟切片與冰凍切片枯一定情況下都要使用。篩選抗體時(shí)用石蠟切片，可以選出效價(jià)高，能在石蠟切片上染色的抗體。但是石蠟切片經(jīng)過了酒精及二甲苯脂溶劑的處理，脂性抗原已經(jīng)去掉，所以與脂溶性抗原有關(guān)的抗體不能篩選出來(lái)。在確定抗體與那些組織有交叉反應(yīng)時(shí)，則必須用冰凍切片，因?yàn)楸鶅銮衅?，抗原未丟失，若無(wú)交叉反應(yīng)，才是真正的沒有交叉，所以用石蠟切片檢測(cè)抗體有無(wú)與其它組織反應(yīng)是不可靠的。

　　單克隆抗體的特異性

　　單克隆抗體能在人體應(yīng)用有效，必須有較高的特異性及親合力。

　　首先必須與大多數(shù)胃癌標(biāo)本切片中的胃癌細(xì)胞呈陽(yáng)性反應(yīng)。如能對(duì)其中多數(shù)細(xì)胞和各種類型的胃癌都起陽(yáng)性反應(yīng)則更好。醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)收集，整理MG系列的鼠鼠抗體對(duì)各種不同分化的胃癌陽(yáng)性率為67%～100%，pCI抗體對(duì)胃癌的結(jié)合力是比較強(qiáng)的。

　　另一個(gè)檢測(cè)特異性的辦法是將抗體用核素標(biāo)記后注入帶人胃癌的裸鼠中，觀察有關(guān)抗體是否向人腫瘤中濃集。如將胃癌的單抗MGb2結(jié)合131I后，給荷人胃癌裸鼠注射，則可在體外顯像。在注射后第7天時(shí)，瘤正常組織的放射比為16.22，說(shuō)明抗體可在胃癌中濃集16倍。同時(shí)可結(jié)合131IMGb抗體注入后，腫瘤生長(zhǎng)慢，瘤組織中呈大片壞死，而空白對(duì)照，單純抗體的對(duì)照組腫瘤生長(zhǎng)快，分裂相多而極少壞死。

　　在體外也可將抗體交聯(lián)抗癌藥物，加入胃細(xì)胞的培養(yǎng)系統(tǒng)中，以觀察抗體結(jié)合藥物后比單純藥物或單純抗體有更強(qiáng)的導(dǎo)向殺傷作用。對(duì)殺傷的細(xì)胞的檢測(cè)，過去都用Cr51釋放，3HTdr摻入等方法，現(xiàn)在多用噻唑蘭（MTT）的方法，此法不用核素，比較完全，準(zhǔn)確度也不差。當(dāng)然抗體在荷人腫瘤的裸鼠中能濃集，所以殺傷腫瘤作用也不明顯。因?yàn)閱慰寺】贵w由鼠產(chǎn)生，對(duì)鼠的組織不發(fā)生反應(yīng)，只對(duì)所帶人的腫瘤反應(yīng)，所以這種濃集是順理成章的，但當(dāng)人用時(shí)，各種人的組織難免在抗原性上與人的胃癌有交叉反應(yīng)，所以濃集起來(lái)就困難得多。

　　當(dāng)然檢測(cè)單克隆抗體特異性的指標(biāo)還有許多，如在免疫電鏡下看標(biāo)記抗體是否能特異地與胃癌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)結(jié)合或向細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)移（內(nèi)化）；還可以檢測(cè)抗體的親合力。

　　單克隆抗體人體內(nèi)應(yīng)用

　　單克隆抗體的應(yīng)用很多，如用它作免疫組織化學(xué)的試劑，進(jìn)行病理診斷，用它裝備ELISA試劑盒進(jìn)行胃癌血清學(xué)診斷等。這些在MG系列及其它系列的胃癌單克隆抗體都有所報(bào)道。但是這里講的是如何把特異性好，在荷人腫瘤的裸鼠中能定位人的胃癌的抗體用于病人的診斷與治療。這種診斷與治療被稱為導(dǎo)向診斷及導(dǎo)向治療。

　　單克隆抗體用于人體前，必須進(jìn)行一些檢查：①無(wú)熱源；②作急性毒試驗(yàn)，如給小鼠尾靜脈注射時(shí)，不發(fā)生死亡或病變等。并經(jīng)自愿者受試，不出現(xiàn)不良反應(yīng)，然后可申報(bào)衛(wèi)生部批準(zhǔn)進(jìn)行臨床病人應(yīng)用。達(dá)到國(guó)家生物制品鑒定部門的標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)過在指定的醫(yī)院進(jìn)行Ⅱ期，Ⅲ期臨床試驗(yàn)后，方能批準(zhǔn)在市場(chǎng)上出售。目前MG系列及pC系列均能在病人身上用其核素標(biāo)記的抗體進(jìn)行顯像，作為腫瘤的診斷，也可用來(lái)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)治療，但尚未取得明確的療效報(bào)告。pC系列研制的產(chǎn)品在手術(shù)時(shí)可批示胃癌病灶或轉(zhuǎn)移病灶的部位，作為手術(shù)導(dǎo)向。

　　人用鼠抗體存在的問題

　　目前大部分單克隆抗體是鼠鼠細(xì)胞融合而成的，抗體本質(zhì)上是鼠的免疫球蛋白。人用后，它可作為抗原使人體產(chǎn)生抗鼠的抗體，人抗鼠抗體很快與注入的鼠抗體發(fā)生作用，使鼠抗體很快失效清除。而鼠抗體對(duì)人來(lái)說(shuō)是異種蛋白，容易發(fā)生過敏，所以目前要用鼠抗體，必須將其進(jìn)行改造。一種辦法是由胃蛋白酶消化鼠抗體使之成為F（Ab）2，這樣保留其與抗原作用的可變區(qū)，去除容易誘發(fā)過敏及抗體產(chǎn)生的FC段，這樣一來(lái)，產(chǎn)生人抗鼠抗體的機(jī)會(huì)就少一些。

　　目前大家都注意用基因工程改造鼠抗體的方法。因?yàn)橛萌巳穗s交瘤產(chǎn)生人的單克隆抗體十分困難。解決的辦法有兩個(gè)，醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)收集，整理一是從病人的淋巴細(xì)胞中單克隆抗腫瘤的抗體基因，表達(dá)的抗體就是人的抗體；另一辦法是對(duì)鼠抗體進(jìn)行基因工程改造，例如可從鼠抗腫瘤單克隆抗體細(xì)胞系中提出其RNA，反轉(zhuǎn)錄成cNDA，用pCR擴(kuò)增，克隆出其輕鏈及重鏈的可變基因，把這種基因在真核細(xì)胞或載體中表達(dá)出來(lái)的一種或可變區(qū)蛋白，即是一種抗腫瘤的小抗體，或者把這種小抗體的基因與人的FC段的基因聯(lián)接，組成一個(gè)嵌合基因，可變區(qū)仍是鼠的，恒定區(qū)是人的，將來(lái)表達(dá)一種嵌合抗體。也有把輕鏈可變區(qū)基因與重鏈可變區(qū)聯(lián)接一條單鏈的抗體，這三條抗體為單鏈抗體、嵌合抗體、小抗體都可試用于臨床，看有無(wú)活性及診斷和治療效果。

　　另外的辦法是將抗腫瘤抗體的輕重鏈可變區(qū)基因與另一個(gè)效應(yīng)基因聯(lián)接，如把腫瘤壞死因子基因，CD8的基因或白細(xì)胞介素2-的基因與抗體基因聯(lián)接，試圖既發(fā)揮抗體的導(dǎo)向作用，又發(fā)揮使腫瘤發(fā)生壞死的腫瘤壞死因子的作用，這些改變是人們正在研究的，以達(dá)到鼠抗體人化目的的一些辦法。