1、常見(jiàn)黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)類型有哪些？

黃酮類化合物經(jīng)典的概念主要是指基本母核為2-苯基色原酮的衍生物?，F(xiàn)泛指兩個(gè)苯環(huán)（A環(huán)與B環(huán)）通過(guò)三個(gè)碳原子相互聯(lián)結(jié)而成，分子結(jié)構(gòu)中具有C6-C3-C6基本碳架的一系列化合物。

根據(jù)中央三碳鏈的氧化程度、B環(huán)連接位置（2位或3位）以及三碳鏈?zhǔn)欠駱?gòu)成環(huán)狀等特點(diǎn)，可將主要天然黃酮類化合物分為黃酮、黃酮醇、二氫黃酮、二氫黃酮醇、異黃酮、二氫異黃酮、查耳酮、二氫查耳酮、花色素、黃烷醇（黃烷-3-醇、黃烷-3，4-二醇）、橙酮、口山酮（雙苯吡酮）、高異黃酮等。

此外尚有由兩分子黃酮或兩分子二氫黃酮，或一分子黃酮及一分子二氫黃酮按C-C或C-O-C鍵方式聯(lián)接而成的雙黃酮類化合物。有少數(shù)黃酮類化合物結(jié)構(gòu)很復(fù)雜，如水飛薊素為黃酮木脂素類化合物，榕堿及異榕堿為生物堿型黃酮。

除O-苷外，天然黃酮類化合物還發(fā)現(xiàn)有C-苷，如葛根黃素、葛根黃素木糖苷，為中藥葛根中的擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈血管的有效成分。

2、黃酮類化合物有哪些重要理化性質(zhì)？

（1）性狀

黃酮類化合物多為結(jié)晶性固體，少數(shù)（如黃酮苷類）為無(wú)定形粉末。

游離的各種黃酮苷元母核中，除二氫黃酮、二氫黃酮醇、黃烷及黃烷醇有旋光性外，其余無(wú)光學(xué)活性。苷類由于在結(jié)構(gòu)中引入糖的分子，故均有旋光性，且多為左旋。

黃酮類化合物的顏色與分子中是否存在交叉共軛體系及助色團(tuán)（OH、OCH3等）的種類、數(shù)目以及取代位置有關(guān)。黃酮、黃酮醇及其苷類多顯灰黃色~黃色，查耳酮為黃色~橙黃色，而二氫黃酮、二氫黃酮醇、異黃酮類，因不具有交叉共軛體系或共軛鏈短，故不顯色（二氫黃酮及二氫黃酮醇）或顯微黃色（異黃酮）。

黃酮、黃酮醇分子中，尤其在7位或4‘位，引入-OH及-OCH3等助色團(tuán)后，因促進(jìn)電子移位、重排，而使化合物的顏色加深。

花色素及其苷元的顏色隨pH不同而改變，一般顯紅（pH＜7）、紫（pH=8.5）、藍(lán)（pH＞8.5）等顏色。

（2）溶解性

一般黃酮苷元難溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、醋酸乙酯、乙醚等有機(jī)溶劑及稀堿水溶液中。其中黃酮、黃酮醇、查耳酮等平面性強(qiáng)的分子，因分子與分子間排列緊密，分子間引力較大，難溶于水；而二氫黃酮和二氫黃酮醇等，因系非平面性分子，分子與分子間排列不緊密，分子間引力降低，有利于分子進(jìn)入，溶解度稍大。

花色素（花青素）苷元雖為平面型結(jié)構(gòu)，但因以離子形式存在，具有鹽的通性，故親水性較強(qiáng)，水中溶解度較大。

黃酮苷元分子中引入羥基，將增加在水中的溶解度；而羥基甲基化后，則增加在有機(jī)溶劑中的溶解度。

黃酮苷一般易溶于水、甲醇、乙醇等強(qiáng)極性溶劑中；難溶或不溶于苯、氯仿等有機(jī)溶劑中。糖鏈越長(zhǎng)，在水中溶解度越大。糖與苷元的連接位置不同，對(duì)苷在水中的溶解度也有一定影響。

（3）酸堿性

①酸性：黃酮類化合物因分子中多具有酚羥基，顯酸性，可溶于堿性水溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基甲酰胺中。由于酚羥基數(shù)目及位置不同，酸性強(qiáng)弱不同。以黃酮為例，其酚羥基酸性強(qiáng)弱順序依次為7，4‘-二羥基＞7或4’-羥基＞一般酚羥基＞5-羥基。

②堿性：γ-吡喃酮環(huán)上的1位氧原子，因有未共用的電子對(duì)，表現(xiàn)出微弱堿性，可與強(qiáng)無(wú)機(jī)酸，如濃硫酸、鹽酸等生成鹽，但生成的鹽極不穩(wěn)定，遇水即分解。黃酮類化合物溶于濃硫酸產(chǎn)生的鹽，常表現(xiàn)出特殊的顏色，可用于鑒別。

3、黃酮類化合物有哪些重要顏色反應(yīng)？

黃酮類化合物的顏色反應(yīng)多與分子中的酚羥基及γ-吡喃酮環(huán)有關(guān)。

（一）還原反應(yīng)

①鹽酸-鎂粉（或鋅粉）反應(yīng)：是鑒定黃酮類化合物最常用的顏色反應(yīng)。多數(shù)黃酮、黃酮醇、二氫黃酮、二氫黃酮醇類化合物顯橙紅色至紫紅色，少數(shù)顯紫色至藍(lán)色。查耳酮、橙酮、兒茶素類則無(wú)該顯色反應(yīng)。異黃酮類除少數(shù)外，也不顯色。

②四氫硼鈉（鉀）反應(yīng)：NaBH4是對(duì)二氫黃酮類化合物專屬性較高的一種還原劑，顯紅色至紫色。

③磷鉬酸反應(yīng)：二氫黃酮可與磷鉬酸試劑反應(yīng)呈現(xiàn)棕褐色，可作為二氫黃酮類化合物的特征鑒別反應(yīng)。

（二）金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)

①鋁鹽：常用試劑為1%三氯化鋁或硝酸鋁溶液。生成的絡(luò)合物多為黃色（λmax=415nm），并有熒光，可用于定性或定量分析。

②鉛鹽：常用1%醋酸鉛及堿式醋酸鉛水溶液，可生成黃色至紅色沉淀。醋酸鉛只能與分子中具有鄰二酚羥基或兼有3-羥基、4-酮基或5-羥基、4-酮基結(jié)構(gòu)的化合物反應(yīng)生成沉淀。而堿式醋酸鉛的沉淀能力要大得多，一般酚類化合物均可與其發(fā)生沉淀反應(yīng)。

③鋯鹽：多用2%二氯氧鋯甲醇溶液。黃酮類化合物分子中有游離的3-或5-羥基存在時(shí)，均可與該試劑反應(yīng)，生成黃色的鋯絡(luò)合物。在實(shí)際應(yīng)用時(shí)，通常同時(shí)使用二氯氧鋯和枸櫞酸，以判斷黃酮類化合物3-OH、5-OH的存在。若有3-OH和（或）5-OH，加二氯氧鋯顯黃色。若只有5-OH，加枸櫞酸后黃色減褪，若有3-OH，則加枸櫞酸后黃色不變，因此可用于區(qū)分黃酮和黃酮醇。

④鎂鹽：常用醋酸鎂甲醇溶液為顯色劑，二氫黃酮、二氫黃酮醇類可顯天藍(lán)色熒光。

⑤氯化鍶（SrCl2）：在氨性甲醇溶液中，氯化鍶可與分子中具有鄰二酚羥基結(jié)構(gòu)的黃酮類化合物生成綠色至棕色乃至黑色沉淀。

⑥三氯化鐵

（三）硼酸顯色反應(yīng)

黃酮類化合物分子中具有5-羥基黃酮及2‘-羥基查耳酮類結(jié)構(gòu)時(shí)，在無(wú)機(jī)酸或有機(jī)酸存在條件下，可與硼酸反應(yīng)，生成亮黃色。

（四）堿性試劑顯色反應(yīng)

①二氫黃酮易在堿液中開(kāi)環(huán)，轉(zhuǎn)變成相應(yīng)的異構(gòu)體查耳酮，顯橙色至黃色。

②黃酮醇類在堿液中先呈黃色，通入空氣后變?yōu)樽厣?

③分子結(jié)構(gòu)中有鄰二酚羥基或3，4‘-二羥基取代時(shí)，在堿液中不穩(wěn)定，易被氧化，產(chǎn)生沉淀。

4、黃酮類化合物常用提取純化方法有哪些？

黃酮苷類以及極性稍大的苷元（如羥基黃酮、雙黃酮、橙酮、查耳酮等），一般可用丙酮、醋酸乙酯、乙醇、水或一些極性較大的混合溶劑進(jìn)行提取。其中用得最多的是醇-水（1：1）或甲醇。一些多糖苷類則可以用沸水提取。為了避免在提取過(guò)程中黃酮苷類發(fā)生水解，常按一般提取苷的方法事先破壞酶的活性。大多數(shù)黃酮苷元宜用極性較小的溶液，如氯仿、乙醚、醋酸乙酯等提取，對(duì)多甲氧基黃酮的游離苷元，亦可用苯進(jìn)行提取。

（1）溶液萃取法：一般而言，苷元多用氯仿或乙醚萃取，單糖苷可用醋酸乙酯萃取，多糖苷可用水飽和正丁醇萃取。也可采用逆流分配法，常用的溶液系統(tǒng)有：水-醋酸乙酯，正丁醇-石油醚等。

（2）堿提取沉淀法：一些黃酮苷類，如蘆丁、橙皮苷、黃芩苷等，雖有一定極性，可溶于水或堿水，但難溶于酸水。此時(shí)可用堿水提取，再將堿水提取液調(diào)成酸性，黃酮苷類可沉淀析出。但需要注意，所用堿液濃度不宜過(guò)高；加酸酸化時(shí)，酸性也不宜過(guò)強(qiáng)。當(dāng)藥材含有大量果膠、粘液等水溶性雜質(zhì)時(shí)（如花、果類藥材），宜用石灰乳或石灰水代替其他堿性水溶液進(jìn)行提取。

（3）炭粉吸附法：主要用于苷的精制。甲醇粗提物被活性炭吸附后，大部分黃酮苷可用7%酚-水洗下。（一）B17