方法名稱: 葛根素注射液—葛根素的測(cè)定—高效液相色譜法
應(yīng)用范圍: 本方法采用高效液相色譜法測(cè)定葛根素注射液中葛根素(C21H20O9)的含量。
本方法適用于葛根素注射液。
方法原理: 供試品制成流動(dòng)相溶液,進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離,用紫外吸收檢測(cè)器,于波長(zhǎng)250nm處檢測(cè)葛根素吸收值,計(jì)算出其含量。
試劑: 1. 0.1%枸櫞酸溶液
2. 甲醇
儀器設(shè)備: 1. 儀器
1.1 高效液相色譜儀
1.2 色譜柱
十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,理論塔板數(shù)按葛根素峰計(jì)算不低于2500,葛根素峰與相鄰雜質(zhì)峰間的分離度應(yīng)符合要求。
1.3 紫外吸收檢測(cè)器
2. 色譜條件
2.1 流動(dòng)相:0.1%枸櫞酸溶液 甲醇=75 25。
2.2 檢測(cè)波長(zhǎng):250nm
2.3 柱溫:室溫
試樣制備: 1. 量取供試品
精密量取本品適量。
2. 對(duì)照品溶液的制備
精密稱取適量,加流動(dòng)相溶液溶解并制成每1mL含50μg的溶液,搖勻,即得。
3. 供試品溶液的制備
將供試品加流動(dòng)相溶液溶解并制成每1mL含50μg的溶液,搖勻,即得。
注:“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。
操作步驟: 分別精密吸取上述對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μL 注入高效液相色譜儀,用紫外吸收檢測(cè)器,于波長(zhǎng)250nm處測(cè)定葛根素的吸收值,計(jì)算出其含量。
參考文獻(xiàn): 中華人民共和國(guó)藥典,國(guó)家藥典委員會(huì)編,化學(xué)工業(yè)出版社,2005年版,二部,p.689。