雙黃連口服液由金銀花、黃芩及連翹經(jīng)提取精制而成，具有辛涼解表、清熱解毒功效，對于上呼吸道感染、扁桃體炎、咽炎、病毒性肺炎等細(xì)菌和病毒感染性疾病有一定療效。其中綠原酸、黃芩苷、連翹苷、漢黃芩素是其主要活性成分。2005年版《中華人民共和國藥典》（一部）采用高效液相色譜法只測定了綠原酸、黃芩苷、連翹苷的含量，而且是采用包括甲醇一醋酸一水、乙腈一醋酸一水的不同流動相分別測定。本試驗(yàn)參照文獻(xiàn)，通過優(yōu)化色譜條件，建立了不經(jīng)提取分離，利用梯度洗脫法同時(shí)測定上述4種成分含量的高效液相色譜法，具有簡便可行、準(zhǔn)確、快速的特點(diǎn)，減少了配制流動相的步驟和進(jìn)樣次數(shù)，提高了工作效率，取得了滿意效果。

方法名稱： 雙黃連口服液—黃芩甙的含量—高效液相色譜法

應(yīng)用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測定雙黃連口服液中黃芩甙含量。

本方法適用于由金銀花,黃芩,連翹等精制而成的雙黃連口服液中黃芩甙的含量測定。

方法原理： 利用反相高效液相色譜法（RP-HPLC）測定雙黃連口服液中黃芩甙含量。固定相為Nova-Pak C18反相柱;流動相為甲醇 水 磷酸=50 50 0.2;檢測波長為276nm。

試劑： 甲醇（色譜純）。

儀器設(shè)備： 1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

Nova-PakC18反相柱（4μm,250mm×4mm）

2 色譜條件

2.1流動相：甲醇 水 磷酸=50 50 0.2

2.3柱溫：40℃

2.4流速：0.8ml/min

2.5檢測波長：276nm

試樣制備： 1.標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

精密稱取一定量的黃芩甙對照品,用50%甲醇配成0.0717mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

2. 供試品溶液的制備

精密吸取雙黃連口服液0.5mL,置100mL容量瓶中,加50%甲醇稀釋至刻度,混勻即可作為供試液。另取處方中除黃芩外的其余藥材,按規(guī)定工藝制備成雙黃連口服液后,依供試液制備方法制成空白液。

操作步驟： 1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

精密吸取黃芩甙對照品標(biāo)準(zhǔn)溶液5,10,15,20,25μL進(jìn)樣測定峰面積,以黃芩甙量（μg）為橫坐標(biāo)X,峰面積為縱坐標(biāo)Y得回歸方程。

2. 供試品的測定

分別吸取對照品溶液和供試品溶液20μL進(jìn)樣測定,按外標(biāo)法計(jì)算樣品中黃芩甙含量。

參考文獻(xiàn)： 莫志江,莫可元.反相高效液相色譜法測定雙黃連口服液中黃芩甙含量.時(shí)珍國醫(yī)國藥,2000,11（3）:196-197.