在生化分析測量中，酶的測定比較復雜，要求條件較高，測試比較困難。一般生化分析儀只要酶的測定準確，重復性好，其它項目的測定一般都會沒有問題。現(xiàn)就生化分析儀酶分析中常見的測試不準確、重復性差的幾點原因進行分析，以供使用者和維修工程師參考。

生化分析儀酶的測定一般用動力學法進行測試，其原理是在酶反應的最適條件下，用物理、化學或酶促反應的分析方法，在反應速度恒定期與被測物的活性或濃度成正比。計算方法有兩種：

1）絕對法：

酶活力（U/L）＝ΔA×（反應液體積/樣品體積）×（1000/消光系數(shù)）

2）相對法：

（U/L或mmol/L）＝［ΔA（測定）/ΔA（標準）］×標準物的活力或濃度

因此，生化分析儀酶的測定與許多條件有關。條件的設置，如：波長、溫度、參數(shù)、測試方法，延遲和測試時間，吸液量等。另外還與廠家的試劑，樣品的采集、保存有關，同時與及時進行質控，從一個樣品進入另一個樣品測試時及時清洗也有很大關系。

例如GPT的測試一般選擇為：波長為340nm，測定時間為20秒，延遲時間為40秒，吸液量為350μl，溫度設定為37℃，試劑空白可任意選擇。

因此GPT的測試結果與以下幾點有關：

1、340nm為波長低端，能量較低，同時340nm濾光片使用較多，易老化。所以波長漂移不準，半寬度變化都會影響測量的準確度和重復性。

2、動態(tài)法測試有延遲時間，測試時間要求。延遲時間在動態(tài)法中為預反應時間醫(yī)學教育|網(wǎng)搜集整理，測試時間在動態(tài)法中為測試的總時間。零級動力學法是針對特定時間段而言的，酶反應剛啟動時反應比較復雜，雜反應較多，必需經(jīng)過一段延遲時間才能進入穩(wěn)定反應期，各試劑商對這兩段時間有嚴格規(guī)定。所以動態(tài)法測試一般溫度在37℃，延遲時間不少于15秒為好。

3、對于參數(shù)的輸入應按試劑要求輸入其給定值，一般試劑商在試劑盒說明書中給予說明。

4、反應溫度。

5、測試空白要準確。

6、吸液量的大小直接影響交叉污染和測量的重復性醫(yī)學教育|網(wǎng)搜集整理，建議測試污染性大的物質試劑量應相應增加。一般應大于400μl，一般項目為500μl即可。

7、測試不準確、重復性差從操作上看主要有：儀器本身原因如比色杯中有氣泡；光源燈老化；光源電壓不穩(wěn)；340nm濾光片性能變差，透射性變??；波長不準確等有關。一般檢查液路接口是否松動漏氣，更換光源燈泡和340nm濾光片即可解決。至于電路問題，加熱元件損壞，溫度不受控的問題只能由工程師解決。

總之酶的測定影響準確度的因素很多，只要認真操作，綜合分析影響測定的各項因素，認真分析，酶測定的問題不難解決的。根據(jù)我們的經(jīng)驗只要試劑、樣品準確，保存得當，樣品預處理仔細，儀器經(jīng)常維護、保養(yǎng)，認真操作，問題會自行解決。