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血漿凝血酶原時間測定方法學(xué)評價-臨床檢驗技師考試輔導(dǎo)

2014-01-15 14:36 來源:
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醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編搜集了有關(guān)臨床檢驗技師考試的復(fù)習(xí)知識點,供廣大考生參考;如下:

方法學(xué)評價:一步法凝血酶原時間測定:由Quick在1935年創(chuàng)建。該法是在抗凝血漿中直接加入試劑一次完成測定,因此稱一步法。當(dāng)時認(rèn)為該試驗只反映了凝血酶原的活性(因子未發(fā)現(xiàn)凝血因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ)。原使用草酸鈉液作為抗凝劑,后來發(fā)現(xiàn)此液不利于凝血因子和保存,故已改用枸櫞酸鈉作抗凝劑。一步法PT常用靜脈抗凝血普通試管法手工測定;也有用毛細(xì)血管微量抗血測定,雖采血量少,但操作較繁瑣,故少用;也可用表面玻皿法測定,準(zhǔn)確性較并管法高,而操作不如后者簡便。近年來,多采用半自動或全自動血液凝固儀測定,也以出現(xiàn)纖維蛋白絲作為終點。

手工法雖重復(fù)性差、耗時,但仍有相當(dāng)程度的準(zhǔn)確性,故仍廣泛應(yīng)用,其中以手工傾斜試管法為參考方法。半自動儀法,提高了光天化日確度和速度,但存在標(biāo)本交叉污染的缺點。全自動儀法克服了半自動儀法不足之處,使檢測更加精確、快速、敏感與方便。

組織凝血活酶試劑質(zhì)量是影響PT測定準(zhǔn)確性最重要的因素之一。組織凝血活酶的不同來源,不同制備方法,使務(wù)實驗室之間及每批試劑之間PT測定的結(jié)果差異大,可比性差,特別影響對口服抗凝血劑患者治療效果的判斷,因此早在1967年,WHO就將功贖罪67/40批號人腦凝血活酶標(biāo)準(zhǔn)品,作為以后制備不同來源的血活酶的參考物,并要求計算和提供每批組織凝血活酶的國際敏感指數(shù)。ISI表示標(biāo)準(zhǔn)品組織凝血活酶與每批組織凝血活酶PT校正曲線的斜率,即在雙對數(shù)的坐標(biāo)紙上,縱坐標(biāo)為用標(biāo)準(zhǔn)品測定的PT對數(shù)值,橫坐標(biāo)為用待校正的組織凝血活酶測定的相同標(biāo)本PT的對數(shù)值。60/40的ISI為1.0.ISI值越低,表示試劑愈敏感。目前務(wù)國大體是用國示標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)化自己制備的本國國家標(biāo)準(zhǔn)品。新的組織凝血活酶標(biāo)準(zhǔn)品來自兔或牛的制備。其它各種組織凝血活酶劑的ISI必須按照新的標(biāo)準(zhǔn)品ISI進(jìn)行校正。其次,WHO等國際的要威機(jī)構(gòu)還要求,PT正常對照值必需至少來自20名以上男女各半的混合血漿所測定得結(jié)果。并且還規(guī)定姨口服抗凝劑的患者必須使用國際PT結(jié)果報告形成,并用以為抗凝治療監(jiān)護(hù)的指標(biāo),INR=(病人凝血酶原時間/正常人平均凝血酶原進(jìn)間)ISI.作PT測定時,首先應(yīng)了解所用的組織凝積壓活酶試劑的ISI,ISI值通常由產(chǎn)生試劑的廠商提供的,測定PT后,即可計算出INR.為使用方便,INR也可從制造商提供的圖表中查提,最初規(guī)定INR必須使用手工法測得,在引入自動化凝血儀后,為了不影響INR的可靠性,制造商還應(yīng)提供儀器相應(yīng)的ISI值。使用ISi 和INR可減少或去除各實驗室PT測定的在技術(shù)和試劑上差異,使抗凝療法監(jiān)測過程中,各種PT結(jié)果有可比性。

近年,國外用重組組織因子作為PT測定。γ-TF比其它動物性來源的漲血活酶對凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅹ敏感性高,但目前未被推廣使用。

一步法PT結(jié)果報告方法:一般情況下,可同時報告被檢標(biāo)本PT和正常對照PT以及PT比率。凝血酶原比率=被檢血漿PT時間/正常血漿PT時間。過去曾用凝血酶原活動度報告,現(xiàn)已少用;當(dāng)PT用于監(jiān)測口服抗凝劑時,則必須同時報告INR值。

二步法凝原時間測定:首先由Warner等創(chuàng)建,后由Ware/Seegers等改良,此法第一步生成凝血酶,第二步是測定生成的凝血酶,從而間接測得凝血酶原時間。二步法雖然雙較合理,但操作繁瑣,未被廣泛應(yīng)用。

[參考值] 一步法凝血酶原時間:11~13s

凝血酶原比值:0.82~1.15

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