醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編搜集了有關(guān)檢驗(yàn)技師考試的復(fù)習(xí)知識(shí)點(diǎn),供廣大考生參考;如下:
1.尿蛋白定性試驗(yàn):尿蛋白定性為過(guò)篩性試驗(yàn),目前常用加熱乙酸法、磺基水楊酸法和干化學(xué)試帶法。
(1)加熱乙酸法:為古老傳統(tǒng)的經(jīng)典方法,加熱煮沸使蛋白變性、凝固,然后加酸使尿PH接近蛋白質(zhì)等電點(diǎn)(PH4.7)有利于已變性蛋白下沉,同時(shí)可消除尿中某些磷酸鹽因加熱析出所致的混濁。干擾因素少,但如加酸過(guò)少,過(guò)多,致遠(yuǎn)離蛋白質(zhì)等電點(diǎn),也可使陽(yáng)性程度減弱。如尿中鹽濃度過(guò)低,也可致段阻性。本法檢測(cè)尿蛋白的敏感度為0.15g/L.
(2)磺基水楊酸法:基原量為在略低于蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的PH條件下,蛋白質(zhì)帶有正電荷的氨基與帶負(fù)電荷的磺基水楊酸根相結(jié)合,形成不溶性蛋白質(zhì)鹽而沉淀。該法操作簡(jiǎn)便敏感,白蛋白、球蛋白,本周蛋白均可發(fā)生反應(yīng)。但在用某些藥物如青霉素鉀鹽及有機(jī)碘造影劑(膽影葡胺、泛影葡胺、碘酸),或在高濃度尿酸、草酸鹽擴(kuò)粘蛋白等作用下均可呈假陽(yáng)性反應(yīng),但加熱煮沸后消失,有別于蛋白尿。現(xiàn)常用為尿蛋白定性試驗(yàn)過(guò)篩方法,本法檢測(cè)蛋白尿的敏感度為0.05-0.1g/L.
(3)干化學(xué)試帶法:本法是利用指示劑的蛋白質(zhì)誤差原理(即拽示劑離子因與白蛋白攜帶電荷相反而結(jié)合,故使其反應(yīng)顯示的PH顏色變?yōu)檩^高PH顏色變化,這種PH顏色改變的幅度與白蛋白含量成正比)而建立的。該法有簡(jiǎn)便快速等優(yōu)點(diǎn),適用于人群普查,還可以用于尿液分析儀,以減少誤差。不同廠家、不同批號(hào)試帶顯色有差異,因此應(yīng)強(qiáng)調(diào)節(jié)采用經(jīng)嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)化的試帶,具體注意事項(xiàng)詳見(jiàn)第八章。
2.尿蛋白定量測(cè)定:尿蛋白定量對(duì)腎疾病的診斷及療效觀察有重在意義,悄尿蛋白定量測(cè)定法有沉淀法、比濁法、比色法(雙縮脲法)、染料結(jié)合法及免疫測(cè)定法等。Edbach法因結(jié)果粗略且費(fèi)時(shí)太長(zhǎng)已被淘汰?;腔畻钏?硫酸鈉雙濁法雖操作簡(jiǎn)便,但因線性范圍窄,可受溫度、PH、時(shí)間、混勻方式等多種因素影響,故重復(fù)性差。此外磺基水楊酸還可與藥物(磺胺、青霉素、有機(jī)碘等)及多肽類物質(zhì)結(jié)合導(dǎo)致假陽(yáng)性,因此目前已少用。比縮脲比色法為蛋白質(zhì)定量的經(jīng)典方法,顯色穩(wěn)定、重復(fù)性好,對(duì)白、球蛋白的反應(yīng)靈感度較一致其主要缺點(diǎn)為靈感度低,考馬斯亮藍(lán)、麗春紅S、溴酚藍(lán)、鄰苯三酚紅鉬等染料結(jié)合法中然都有靈感度高、操作簡(jiǎn)便、快速等優(yōu)點(diǎn),但考馬斯藍(lán)法線性范圍窄,對(duì)白、球蛋白反應(yīng)靈感度不差別,且污染比色杯、不易洗凈。麗春紅S中有干擾因素少的優(yōu)點(diǎn),但需用三氯乙酸沉淀,操作較繁,職離心沉淀不完全也可影響測(cè)定結(jié)果。鄰苯三酚紅鉬顯色穩(wěn)定,且對(duì)白、球蛋白反應(yīng)的基本一致但易受表面活性劑的干擾,染料質(zhì)量常影響試驗(yàn)結(jié)果。免疫測(cè)定法是利用單克隆抗體技術(shù)的更為靈感、特異的方法,職酶聯(lián)系免疫吸附法、免疫比濁法或放射擊免疫法,可分別測(cè)定白蛋白以及各種不同的蛋球蛋白,因而可從蛋白的性質(zhì)協(xié)助或定位腎小球或腎小管的損害,也可用于糖尿病性腎病的早期診斷,監(jiān)測(cè)腎移植術(shù)后的排異反應(yīng)。
尿蛋白成分復(fù)雜、變化大,故在選用方法時(shí)應(yīng)注意試驗(yàn)與各種蛋白,尤其是白、球蛋白的反應(yīng)靈感度是否上致有些試劑如磺基水楊酸與白蛋白反應(yīng)靈感度比球蛋白高近一倍,且受溫度影響很大。另外由于尿蛋白量波動(dòng)也很大,故應(yīng)了解各種方法的線性范疇,必在時(shí)先做定性試驗(yàn),然后將尿標(biāo)本做適當(dāng)?shù)南♂尯蠖俊?
[參考值] 尿蛋白定性試驗(yàn):陰性
尿蛋白定量試驗(yàn):<0.1g/L或小于等于0.15g/24h
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