1.血液標(biāo)本的采集

　　血液標(biāo)本的采集，可分為毛細(xì)血管采血法和靜脈采血法。DETA-K2抗凝劑對(duì)血細(xì)胞形態(tài)影響很小，因此適用于血細(xì)胞計(jì)數(shù)，特別是血小板計(jì)數(shù)。血細(xì)胞分析儀使用標(biāo)本一般要求為靜脈抗凝血，為了避免淤血和濃縮，壓脈帶壓迫時(shí)間不可過(guò)長(zhǎng)，最好不超過(guò)半分鐘。因?yàn)槊?xì)血管標(biāo)本，受末梢血循環(huán)狀態(tài)、采血技術(shù)的影響，有時(shí)血液易形成小凝塊，堵塞機(jī)器造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。

　　2.血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)

　　血液標(biāo)本在室溫中必須6 h內(nèi)上機(jī)檢測(cè)，上機(jī)前一定要將血液標(biāo)本顛倒混勻至少8次，如需制備血涂片，應(yīng)在采血后3 h內(nèi)涂制。無(wú)論多先進(jìn)的血液分析儀，只能當(dāng)作一種過(guò)篩手段，不能完全替代目視法顯微鏡鏡檢,因?yàn)閮x器還不能準(zhǔn)確區(qū)分幼稚細(xì)胞、異常淋巴細(xì)胞、有核紅細(xì)胞等。因此，當(dāng)出現(xiàn)白細(xì)胞、紅細(xì)胞及血小板明顯升高或降低，白細(xì)胞分類(lèi)出現(xiàn)異常結(jié)果，白細(xì)胞、紅細(xì)胞及血小板直方圖或散點(diǎn)圖出現(xiàn)異常，均應(yīng)用顯微鏡涂片復(fù)查。

　　3.血涂片的制備

　　血涂片既可由非抗凝的靜脈血和毛細(xì)血管血制備，也可由DETA-K2抗凝血制備，EDTA-K2抗凝血中，鈣離子被螯合后，能阻止血小板聚集，推片時(shí)血小板均勻平均，顯微鏡下易于對(duì)血小板進(jìn)行觀察評(píng)價(jià)，但有時(shí)可觀察到因EDTA-K2引起的紅細(xì)胞皺縮及白細(xì)胞叢集現(xiàn)象，因此最好使用非抗凝血制備涂片，這樣可減少因抗凝劑所致的人工假象。涂片的好壞與血滴大小、推片與載片之間角度有關(guān)；血膜分布不均，主要是推片邊緣不齊，用力不均或載玻片不清潔所致，將制成的血膜在空氣中揮動(dòng)，使迅速干燥，以免血細(xì)胞皺縮。

　　4.血涂片的染色

　　瑞氏-姬姆薩混合染色，兩種染色法各有其優(yōu)缺點(diǎn)，故在細(xì)胞學(xué)檢查中常將兩者結(jié)合起來(lái)，取長(zhǎng)補(bǔ)短，細(xì)胞的胞質(zhì)、顆粒、核等染色均較滿(mǎn)意；染色環(huán)境的pH對(duì)著色影響很大，應(yīng)維持在pH值6.4~6.8，因此必須使用緩沖液；未干透血膜不能立即染色，否則染色時(shí)易脫落。

　　5.血涂片的鏡檢

　　選擇血涂片的體尾交界處染色良好的部分，在油鏡下按一定方式有規(guī)律地移動(dòng)視野，一般計(jì)數(shù)100個(gè)~200個(gè)白細(xì)胞，醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)|收集整理同時(shí)注意白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板形態(tài)的改變和分布，有無(wú)血液寄生蟲(chóng)、有核紅細(xì)胞、幼稚或原始細(xì)胞、異淋細(xì)胞等。