溶血空斑形成的試驗是檢驗主管技師考試要求掌握的內(nèi)容，醫(yī)學教育網(wǎng)搜集整理相關(guān)內(nèi)容供大家參考。

　　經(jīng)典的溶血斑試驗用于檢測實驗動物抗體形成細胞的功能，其原理是將綿羊紅細胞（SRBC）免疫小鼠，4天后取出脾細胞，加入SRBC及補體，混合在溫熱的瓊脂溶液中，澆在平皿內(nèi)或玻片上，使成一蒲層，置37溫育。由于脾細胞內(nèi)的抗體生成細胞可釋放抗SRBC抗體，使其周圍的SRBC致敏，在補體參與下導致SRBC溶血，形成一個肉眼可見的圓形透明溶血區(qū)而成為溶血空斑（plaque）。每一個空斑表示一個抗體形成細胞，空斑大小表示抗體生成細胞產(chǎn)生抗體的多少。這種直接法所測至的細胞為IgM生成細胞，其它類型Ig由于溶血效應較低，不能直接檢測，可用間接檢測法，即在小鼠脾細胞和SRBC混合時，再加抗鼠Ig抗體（如兔抗鼠Ig），使抗體生成細胞所產(chǎn)生的IgG或IgA與抗Ig抗體結(jié)合成復合物，此時能活化補體導致溶血，稱間接空斑試驗。

　　但是上述直接和間接空斑形成試驗都只能檢測抗紅細胞抗體的產(chǎn)生細胞，而且需要事先免疫，難以檢測人類的抗體產(chǎn)生情況。如果用一定方法將SRBC用其它抗原包被，則可檢查與該抗原相應的抗體產(chǎn)生細胞，這種非紅細胞抗體溶血空斑試驗稱為空斑形成試驗，它的應用范圍較大。

　　現(xiàn)在常用的為SPA-SRBC溶血空斑試驗。SPA能與人及多數(shù)哺乳動物IgG的Fc段呈非特異性結(jié)合，利用這一特征，首先將SPA包被SRBC，然后進行溶血空斑測定，可提高敏感度和應用范圍。在該測試系統(tǒng)中，加入抗人Ig抗體，可與受檢細胞產(chǎn)生的免疫球蛋白結(jié)合形成復合物，復合物上的Fc段可與連接在SRBC上的SPA結(jié)合，同時激活補體，使SRBC溶解形成空斑。此法可用于檢測人類外周血中的IgG產(chǎn)生細胞，與抗體的特異性無關(guān)。用抗IgA、IgG或IgM抗體包被SRBC，可測定相應免疫球蛋白的產(chǎn)生細胞，這種試驗稱為反相空斑形成試驗。

　　溶血空斑形成試驗可用于測定藥物和手術(shù)等因素對體液免疫功能的影響，或評價免疫治療或免疫重建后機體產(chǎn)生抗體的功能。