主要方法為聚蔗糖泛影葡胺分層液(ficoll hypaque)密度梯度離心法。分離人外周血單個核細胞時，通常將分層液的比重配成1.077，肝素抗凝血置分層液上，于水平離心機2000r/min離心20分鐘，血液中各種細胞因比重不同而被分開。此外，分層劑還可選用Percoll、Metrizamid及牛血清白蛋白(BSA)等。分離不同動物血中單個核細胞時，對分離液比重的要求各不相同，如小鼠為1.088，大鼠為1.084，馬為1.090等。