這篇簡短的通訊回顧了了EIA和ELISA的歷史背景，這兩種分析方法是由瑞典斯德哥爾摩大學(xué)的Perlmann， Engvall教授以及荷蘭的Schuurs和vanWeemen教授獨立而同時創(chuàng)造完成的。 當(dāng)今，在全球醫(yī)學(xué)實驗室里廣泛應(yīng)用的全自動分析儀每日可以檢測大量的病人標(biāo)本，其中很多儀器都是運用酶標(biāo)記的免疫分析技術(shù)為檢測原理的。自70年代以來，EIA及ELISA的影響主要表現(xiàn)在其作為出現(xiàn)在文獻(xiàn)中的頻率相當(dāng)高。臨床醫(yī)師及其病人，實驗診斷醫(yī)師，體外診斷試劑生產(chǎn)商和世界范圍內(nèi)的衛(wèi)生保健系統(tǒng)都應(yīng)該感謝以上四個科學(xué)家。對于實驗診斷醫(yī)師，體外診斷試劑生產(chǎn)商等來說，EIA以及ELISA是經(jīng)常使用的名詞。本文簡要敘述了酶標(biāo)記的免疫分析技術(shù)的發(fā)展歷史，從60年代該技術(shù)出現(xiàn)，到70年代早期至80年代期間該技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用。

　　第一個出現(xiàn)的EIA和ELISA系統(tǒng)在分析方法是不同的，但是這兩中方法都是建立在免疫分析原理的基礎(chǔ)之上，用酶進行標(biāo)記而不是以放射性核素為標(biāo)記的。兩個科研小組同時而又相互獨立首先提出了這一設(shè)想，并通過必要的實驗驗證了其可行性。瑞典斯德哥爾摩大學(xué)的Perlmann教授和Engvall教授首先提出并發(fā)展了ELISA技術(shù)；荷蘭的Schuurs教授和vanWeemen教授也提出并發(fā)展了EIA技術(shù)。

　　第一個RIA技術(shù)的是美國的Berson和Yalow，1960年，他們首先應(yīng)用該技術(shù)檢測血漿中內(nèi)源性的胰島素。兩人也因“將RIA法用于檢測激素多肽”而獲得了1977年的諾貝爾生理學(xué)獎。但是由于1972年Berson的英年早逝，他沒有能夠分享該項獎勵。1960年，英國的Ekins博士公布了他的發(fā)現(xiàn)，用“飽和度分析法”測定血清甲狀腺激素水平。

　　以放射性核素為標(biāo)記的免疫分析技術(shù)迅速引起了世界范圍內(nèi)的醫(yī)學(xué)醫(yī)生和學(xué)者的注意，在接下來的幾十年里， RIA法發(fā)展十分迅速，并衍生出了多種相關(guān)方法。1968年，Miles和Hales了免疫放射檢測技術(shù)醫(yī)學(xué)教育`網(wǎng)搜集整理，即用放射性核素標(biāo)記的抗體而不是抗原用于檢測人體血漿胰島素水平。

　　在世界范圍內(nèi)的很多實驗室里，都有許多特殊的設(shè)施用于保護實驗室工作人員在眾多用于標(biāo)記抗原或者抗體的放射性核素當(dāng)中安全工作。但是，人們?nèi)匀魂P(guān)心實驗室工作人員的安全，放射性廢物處理，對實驗室特殊設(shè)備的要求以及對昂貴的計數(shù)設(shè)備的采購等。早期的研究都是以I131.

　　Perlmann以后的研究包括人體淋巴細(xì)胞的毒性的研究，免疫原選擇和瘧原蟲疫苗表位圖的研究。Engvall的研究小組以ELISA技術(shù)作為方法，進行了寄生蟲學(xué)，微生物學(xué)行業(yè)腫瘤學(xué)方面的研究。Engvall后來將他的研究方向集中在了組織生物化學(xué)，諸如纖維粘連蛋白，層粘連蛋白，整合素以及肌營養(yǎng)不良方面。Engvall的實驗室目前正在研究不同的因素對肌肉組織再生和非肌肉組織向肌肉組織轉(zhuǎn)化或取代的影響。

　　60年代末70年代初，由于財力原因，很多個人研究者跟不上制造商，如德國的Boehringer Mannheim公司，美國的Abbott公司，荷蘭的Organon Teknika公司的步伐，致使很多個人RIA檢測系統(tǒng)實質(zhì)上都是延續(xù)著一種“家庭作坊”式的模式。EIA和ELISA試劑盒商業(yè)化的啟動，抗原和抗體能緊密結(jié)合于固體物質(zhì)的固相技術(shù)應(yīng)用于微滴定板。技術(shù)上的優(yōu)勢導(dǎo)致了自動加樣設(shè)備，多通道加樣器和自動洗板機、讀板機的發(fā)明。80年代， Boehringer Mannheim公司和Abbott公司眾多公司中率先制造出了全自動檢測設(shè)備。就是依然活躍在醫(yī)學(xué)實驗室的檢測系統(tǒng)。

　　EIA和ELISA這兩個前景廣闊的技術(shù)產(chǎn)生了一系列相關(guān)實驗，包括酶免疫測定和各種“三明治形式”的實驗。需要對此進行深入了解的讀者可以查閱參考文獻(xiàn)23.荷蘭的一個研究小組成功地將EIA法引入內(nèi)分泌激素的分析，包括血清HCG，雌激素和人類胎盤催乳素水平的檢測。盡管如此，直到70年代末80年代初，這種新的實驗方法都沒有能成功地在商業(yè)上形成一定的規(guī)模，因為與之競爭的是早已問世且也具有精細(xì)分析水平的RIA分析法。

　　70年代早期，通過血液檢測病毒感染的疾病如乙型肝炎病毒抗原的檢測不是靠全自動或者半自動的RIA法就是靠血清凝集試驗。1976年，荷蘭Organon Teknika的研究小組運用EIA法檢測乙型肝炎表面抗原獲得成功，并推出了市售的以96孔模板為特征的乙型肝炎表面抗原檢測系統(tǒng)。這是第一個取得了商業(yè)運作的EIA技術(shù)。隨后，對于微生物和病毒的診斷試驗如風(fēng)疹抗體，弓行蟲抗體相繼開展，1980年，開始使用EIA法檢測人類免疫缺陷病毒抗體。

　　免疫分析診斷法，包括RIA，EIA和ELISA，醫(yī)學(xué)教育`網(wǎng)搜集整理對病人、臨床醫(yī)生和衛(wèi)生保健系統(tǒng)的影響是十分巨大的。為了證明這點，筆者分別在PubMed檢索系統(tǒng)中輸入“enzymeimmunoassay”，“enzymelinked immunoassay”和“RIA”，，以五年為一個階段，檢索了1960年到2005年期間發(fā)表的所有論文。將以以上三個詞語為的論文數(shù)量進行了估計，并將此數(shù)據(jù)繪制成圖。結(jié)果讓人吃驚。RIA法的高峰處在80年到90年之間。90年以后到2000年論文數(shù)量就逐漸減少了。但是仍然還很固定。而以EIA或者ELISA為的文章在80年以后就迅速增長，90年代以后穩(wěn)定在驚人的每5年40000篇文獻(xiàn)左右，目前還沒未見有下降的趨勢。

　　總之，在世界范圍內(nèi)，以這些檢測方法為手段的臨床研究數(shù)量是巨大的。因此，我們可以估計日常臨床工作中使用免疫分析方法的頻率是很驚人的。EIA和ELISA，作為各種各樣的免疫分析法中的非放射性免疫分析方法，在臨床上的地位是無法取代的。1976年，即在， Schuurs， Engvall和VanWeemen發(fā)表了他們的論文5年以后，他們獲得了德國科學(xué)獎勵“Biochemische Analytik”。拋開他們的發(fā)現(xiàn)在總體上對臨床診斷和健康保健的影響，就單說對于體外診斷工業(yè)的發(fā)展，這四個學(xué)者也應(yīng)該獲得這些榮譽。

　　在這篇歷史通訊還在攥寫的時候，一個不幸的消息傳來，那就是Perlmann博士于2005年4月19日在斯德哥爾摩去世了。盡管如此，他還是在2005年3月收到了這篇文章的草稿。