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腮腺非腫瘤性疾病混合唾液和腮腺液的細(xì)菌學(xué)研究

  腮腺非腫瘤性疾病,主要包括舍格倫綜合征(Sjgrenssyndrome,簡稱SS)、腮腺良性肥大和腮腺慢性炎癥。本研究對29例腮腺非腫瘤性疾病患者和10名正常對照者進(jìn)行了混合唾液和腮腺液的需氧菌、厭氧菌總數(shù)及5種常見的口腔致病菌,包括產(chǎn)黑菌(Bacteroidesmelaninogenicus)、放線菌(Actinomyces)、變鏈菌(Streptococcusmutans)、乳酸菌(Lactobacillus)和核梭菌(Fusobacteriummucleatum)數(shù)量的對比研究,以加深對涎腺疾病與口腔微生態(tài)系統(tǒng)之間相互關(guān)系的了解,進(jìn)而對相關(guān)疾病的診斷、治療及預(yù)防提供可能的指導(dǎo)依據(jù)。

  材料和方法

  1.病例選擇:①實(shí)驗(yàn)組共29例患者,均來自我院涎腺疾病中心專業(yè)門診,年齡37~65歲,平均54.3歲。SS組11例,女性10例,男性1例,均按已有的診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷,其中7例原發(fā)性SS,4例繼發(fā)性SS;腮腺良性肥大組10例,男性6例,女性4例;腮腺慢性炎癥組8例,男性5例,女性3例,4例為慢性阻塞性腮腺炎,4例為成人復(fù)發(fā)性腮腺炎。SS組和炎癥組均未選擇腺體功能嚴(yán)重受損、無唾液分泌或造影示腮腺萎縮者。②對照組10例,男性6例,女性4例,年齡32~68歲,平均56.4歲。無口干主訴、無涎腺病史及系統(tǒng)性疾病史;口腔內(nèi)無急、慢性炎性病灶。要求所有測試對象口腔衛(wèi)生狀況良好,經(jīng)臨床檢查,牙齦出血指數(shù)為0~1度。測試前2周內(nèi)無使用抗菌藥物史。

  2.取材方法:混合唾液的收集:每個受試者晨起空腹,不刷牙,不漱口,于上午9:00~10:00在安靜狀態(tài)下,平坐于牙科椅上,測試者用一無菌滴管吸取受試者口底粘液池積聚的唾液0.5ml并移至無菌試管內(nèi)(唾液較少者,取0.1~0.2ml)。腮腺液的收集:用無菌一次性注射器連于一特制的涎腺造影插管,吸入0.9%滅菌生理鹽水1.0ml。2.5%碘酊常規(guī)消毒腮腺導(dǎo)管口后,將插管插入腮腺導(dǎo)管內(nèi),用生理鹽水沖洗導(dǎo)管,并回吸沖洗液于注射器內(nèi)。

  3.細(xì)菌培養(yǎng)分離:取稀釋度為10-5的混合唾液標(biāo)本0.1ml,分別接種到普通血瓊脂培養(yǎng)基(用于需氧菌分離培養(yǎng)),CDC固體培養(yǎng)基(用于厭氧菌和產(chǎn)黑菌分離培養(yǎng)),CFAT選擇培養(yǎng)基(用于放線菌分離培養(yǎng))中;取稀釋度為10-3的混合唾液標(biāo)本0.1ml,分別接種到MSA培養(yǎng)基(用于兼性鏈球菌和變鏈菌分離培養(yǎng)),Rogosa選擇培養(yǎng)基(用于乳酸菌分離培養(yǎng)),F(xiàn)NS選擇培養(yǎng)基(用于核梭菌分離培養(yǎng))中;取稀釋度為10-2的腮腺液標(biāo)本0.1ml,分別接種到上述6種培養(yǎng)基中。需氧菌在37℃恒溫溫箱中培養(yǎng)48小時;微需氧菌(包括兼性鏈球菌、變鏈菌和乳酸菌)置于含90%N2和10%CO2的厭氧罐中,37℃恒溫溫箱中,兼性鏈球菌和變鏈菌培養(yǎng)48小時,乳酸菌培養(yǎng)4天;厭氧菌(包括產(chǎn)黑菌、放線菌和核梭菌)置于含80%N2,10%CO2和10%H2的厭氧罐中(含還原劑鈀粒),37℃恒溫溫箱中,產(chǎn)黑菌和放線菌培養(yǎng)5天,核梭菌培養(yǎng)48小時。細(xì)菌鑒定方法參照Bergeys細(xì)菌學(xué)鑒定手冊,用JLQ-S1型菌落計數(shù)器計數(shù)每個平皿的菌落數(shù)醫(yī)學(xué)教育 網(wǎng)搜集整理。

  4.統(tǒng)計學(xué)處理:將混合唾液標(biāo)本培養(yǎng)結(jié)果(CFU/ml唾液)取Lg值后,用SYSTAT統(tǒng)計軟件包進(jìn)行t檢驗(yàn),P值<0.05為有顯著性意義。

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