醫(yī)療機(jī)構(gòu)新型冠狀病毒核酸檢測(cè)工作手冊(cè)（試行第二版）

2020-12-30 16:02 醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)

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醫(yī)療機(jī)構(gòu)新型冠狀病毒核酸檢測(cè)工作手冊(cè)（試行第二版）全文：

為落實(shí)國(guó)務(wù)院應(yīng)對(duì)新型冠狀病毒感染肺炎疫情聯(lián)防聯(lián)控機(jī)制《關(guān)于做好新冠肺炎疫情常態(tài)化防控工作的指導(dǎo)意見(jiàn)》（國(guó)發(fā)明電〔2020〕14號(hào)）要求，進(jìn)一步規(guī)范新型冠狀病毒（以下簡(jiǎn)稱新冠病毒）核酸檢測(cè)的技術(shù)人員、標(biāo)本單采、標(biāo)本混采、標(biāo)本管理、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)、結(jié)果報(bào)告等工作，保證檢測(cè)質(zhì)量，提高檢測(cè)效率，滿足新冠病毒核酸檢測(cè)需求，特制定本手冊(cè)。本手冊(cè)適用于所有開(kāi)展新冠病毒核酸檢測(cè)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)。

一、技術(shù)人員基本要求

（一）采樣人員。從事新冠病毒核酸檢測(cè)標(biāo)本采集的技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)經(jīng)過(guò)生物安全培訓(xùn)（培訓(xùn)合格），熟悉標(biāo)本種類和采集方法，熟練掌握標(biāo)本采集操作流程及注意事項(xiàng)，做好標(biāo)本信息的記錄，確保標(biāo)本質(zhì)量符合要求、標(biāo)本及相關(guān)信息可追溯。

（二）檢測(cè)人員。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)具備相關(guān)專業(yè)的大專以上學(xué)歷或具有中級(jí)及以上專業(yè)技術(shù)職務(wù)任職資格，并有2年以上的實(shí)驗(yàn)室工作經(jīng)歷和基因檢驗(yàn)相關(guān)培訓(xùn)合格證書。實(shí)驗(yàn)室配備的工作人員應(yīng)當(dāng)與所開(kāi)展檢測(cè)項(xiàng)目及標(biāo)本量相適宜，以保證及時(shí)、熟練地進(jìn)行實(shí)驗(yàn)和報(bào)告結(jié)果，保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。

二、標(biāo)本采集基本要求

（一）基本原則。

1.各醫(yī)療機(jī)構(gòu)的檢測(cè)能力應(yīng)當(dāng)與門急診就診人次、住院人次等診療量相匹配，并與采集的標(biāo)本量相適應(yīng)，避免采集數(shù)量明顯超出檢測(cè)能力導(dǎo)致的標(biāo)本積壓、標(biāo)本失效、檢測(cè)結(jié)果反饋遲緩等問(wèn)題。

2.各醫(yī)療機(jī)構(gòu)在采集標(biāo)本時(shí)，要根據(jù)不同采集對(duì)象設(shè)置不同的采樣區(qū)域，將發(fā)熱患者與其他患者、“愿檢盡檢”人群分區(qū)采樣，避免交叉感染。

3.標(biāo)本采集應(yīng)當(dāng)在滿足本機(jī)構(gòu)發(fā)熱門診、住院患者、陪護(hù)人員及院內(nèi)職工的檢測(cè)需求基礎(chǔ)上，進(jìn)一步保障其他重點(diǎn)人群“應(yīng)檢盡檢”和一般人群“愿檢盡檢”的要求。

（二）采樣點(diǎn)設(shè)置。醫(yī)療機(jī)構(gòu)設(shè)置新冠病毒采樣點(diǎn)應(yīng)當(dāng)遵循安全、科學(xué)、便民的原則。采樣點(diǎn)應(yīng)當(dāng)為獨(dú)立空間，具備通風(fēng)條件，內(nèi)部劃分相應(yīng)的清潔區(qū)和污染區(qū)，配備手衛(wèi)生設(shè)施或裝置。采樣點(diǎn)需設(shè)立清晰的指引標(biāo)識(shí)，并明確采樣流程和注意事項(xiàng)。設(shè)立獨(dú)立的等候區(qū)域，盡可能保證人員單向流動(dòng)，落實(shí)“1米線”間隔要求，嚴(yán)控人員密度。

（三）人員配置及防護(hù)要求。每個(gè)采樣點(diǎn)應(yīng)當(dāng)配備1-2名采樣人員。合理安排采樣人員輪替，原則上每2-4小時(shí)輪崗休息1次。采樣人員防護(hù)裝備要求：N95及以上防護(hù)口罩、護(hù)目鏡、防護(hù)服、乳膠手套、防水靴套；如果接觸患者血液、體液、分泌物或排泄物，戴雙層乳膠手套；手套被污染時(shí)，及時(shí)更換外層乳膠手套。每采一個(gè)人應(yīng)當(dāng)進(jìn)行嚴(yán)格手消毒或更換手套。

（四）采樣流程。各醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)建立新冠病毒核酸檢測(cè)采樣操作流程制度，根據(jù)采樣對(duì)象類別確定具體采樣流程，包括預(yù)約、繳費(fèi)、信息核對(duì)、采樣、送檢、報(bào)告發(fā)放等。應(yīng)當(dāng)利用條碼掃描等信息化手段采集受檢者信息。標(biāo)本采集前，采樣人員應(yīng)當(dāng)對(duì)受檢者身份信息進(jìn)行核對(duì)，并在公共區(qū)域以信息公告形式告知核酸檢測(cè)報(bào)告發(fā)放時(shí)限和發(fā)放方式。每個(gè)標(biāo)本應(yīng)當(dāng)至少記錄以下信息：1.受檢者（患者）姓名、身份證號(hào)、居住地址、聯(lián)系方式；2.采樣單位名稱、標(biāo)本編號(hào)，標(biāo)本采集的日期、時(shí)間、采集部位、類型、數(shù)量等。

（五）采樣管選擇。人群篩查應(yīng)選擇具有病毒滅活功能如含胍鹽（異硫氰酸胍或鹽酸胍等）或表面活性劑的采樣管。首選含胍鹽的采樣管。發(fā)熱門診或急診的快速檢測(cè)，則根據(jù)所用的核酸檢測(cè)試劑的要求確定采樣管。

（六）采集方法。應(yīng)當(dāng)采集呼吸道標(biāo)本，包括上呼吸道標(biāo)本（首選鼻咽拭子等）或下呼吸道標(biāo)本（呼吸道吸取物、支氣管灌洗液、肺泡灌洗液、深咳痰液等）。其中，重癥病例優(yōu)先采集下呼吸道標(biāo)本；根據(jù)臨床需要可留取便標(biāo)本。對(duì)集中隔離人員，要通過(guò)鼻咽拭子采集上呼吸道標(biāo)本；對(duì)其他人員，要首選鼻咽拭子。

1.鼻咽拭子。采樣人員一手輕扶被采集人員的頭部，一手執(zhí)拭子貼鼻孔進(jìn)入，沿下鼻道的底部向后緩緩深入，由于鼻道呈弧形，不可用力過(guò)猛，以免發(fā)生外傷出血。待拭子頂端到達(dá)鼻咽腔后壁時(shí)，輕輕旋轉(zhuǎn)一周（如遇反射性咳嗽，應(yīng)停留片刻），然后緩緩取出拭子，將拭子頭浸入含2～3ml病毒保存液的管中。

2.口咽拭子（無(wú)法采集鼻咽拭子時(shí)可選用）。被采集人員先用生理鹽水漱口，采樣人員將拭子放入無(wú)菌生理鹽水中濕潤(rùn)(禁止將拭子放入病毒保存液中，避免抗生素引起過(guò)敏)，被采集人員頭部微仰，嘴張大，并發(fā)“啊”音，露出兩側(cè)咽扁桃體，將拭子越過(guò)舌根，在被采集者兩側(cè)咽扁桃體稍微用力來(lái)回擦拭至少3次，然后再在咽后壁上下擦拭至少3次，將拭子頭浸入含2～3ml病毒保存液的管中，尾部棄去，旋緊管蓋。

3.深咳痰液。要求患者深咳后，將咳出的痰液收集于含3ml采樣液的50ml螺口塑料管中。如果痰液未收集于采樣液中，可在檢測(cè)前，加入2～3ml采樣液，或加入與痰液等體積的含1g/L蛋白酶K的磷酸鹽緩沖液將痰液化。

4.鼻咽或呼吸道抽取物。用與負(fù)壓泵相連的收集器從鼻咽部抽取粘液或從氣管抽取呼吸道分泌物。將收集器頭部插入鼻腔或氣管，接通負(fù)壓，旋轉(zhuǎn)收集器頭部并緩慢退出，收集抽取的粘液，并用3ml采樣液沖洗收集器1次（亦可用小兒導(dǎo)尿管接在50ml注射器上來(lái)替代收集器）。

5.支氣管灌洗液。將收集器頭部從鼻孔或氣管插口處插入氣管（約30cm深處），注入5ml生理鹽水，接通負(fù)壓，旋轉(zhuǎn)收集器頭部并緩慢退出。收集抽取的粘液，并用采樣液沖洗收集器1次（亦可用小兒導(dǎo)尿管接在50ml注射器上來(lái)替代收集）。

6.肺泡灌洗液。局部麻醉后將纖維支氣管鏡通過(guò)口或鼻經(jīng)過(guò)咽部插入右肺中葉或左肺舌段的支管，將其頂端契入支氣管分支開(kāi)口，經(jīng)氣管活檢孔緩緩加入滅菌生理鹽水，每次30～50ml，總量100～250ml，不應(yīng)超過(guò)300ml。

三、標(biāo)本管理基本要求

（一）標(biāo)本包裝。所有標(biāo)本應(yīng)當(dāng)放在大小適合的帶螺旋蓋內(nèi)有墊圈、耐冷凍的標(biāo)本采集管里，擰緊。容器外注明標(biāo)本編號(hào)、種類、姓名及采樣日期。將密閉后的標(biāo)本放入大小合適的塑料袋內(nèi)密封，每袋裝一份標(biāo)本。

（二）標(biāo)本送檢。標(biāo)本采集后室溫放置不超過(guò)4小時(shí)，應(yīng)在2-4h內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室。如果需要長(zhǎng)途運(yùn)輸標(biāo)本，應(yīng)采用干冰等制冷方式進(jìn)行保存，嚴(yán)格按照相關(guān)規(guī)定包裝運(yùn)輸。

（三）標(biāo)本接收。標(biāo)本接收人員的個(gè)人防護(hù)按采樣人員防護(hù)裝備執(zhí)行。標(biāo)本運(yùn)送人員和接收人員對(duì)標(biāo)本進(jìn)行雙簽收。

（四）標(biāo)本保存。用于病毒分離和核酸檢測(cè)的標(biāo)本應(yīng)當(dāng)盡快進(jìn)行檢測(cè)；含胍鹽保存液采樣管采集的標(biāo)本可根據(jù)采樣管說(shuō)明書要求的保存條件及時(shí)間要求進(jìn)行運(yùn)送和保存。24小時(shí)內(nèi)無(wú)法檢測(cè)的標(biāo)本則應(yīng)置于-70℃或以下保存（如無(wú)-70℃保存條件，則于-20℃冰箱暫存）。

境外高風(fēng)險(xiǎn)區(qū)域人群以及新冠肺炎患者的密接者和密接者的密接者等集中隔離人員的核酸檢測(cè)標(biāo)本，檢測(cè)后，應(yīng)當(dāng)在-20℃保存7天。其他一般人群篩查標(biāo)本，則可在-4℃保存24小時(shí)。應(yīng)當(dāng)設(shè)立專庫(kù)或?qū)９駟为?dú)保存標(biāo)本。標(biāo)本運(yùn)送期間避免反復(fù)凍融。

四、實(shí)驗(yàn)室管理基本要求

（一）實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)要求。開(kāi)展核酸檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)當(dāng)符合《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》（國(guó)務(wù)院令第424號(hào)）和《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理辦法》（衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)〔2010〕194號(hào)）有關(guān)規(guī)定，具備經(jīng)過(guò)衛(wèi)生健康行政部門審核備案的生物安全二級(jí)及以上實(shí)驗(yàn)室條件，以及臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室條件。獨(dú)立設(shè)置的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室還應(yīng)當(dāng)符合《醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室基本標(biāo)準(zhǔn)（試行）》《醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范（試行）》等要求。

（二）實(shí)驗(yàn)室分區(qū)要求。原則上開(kāi)展新冠病毒核酸檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)設(shè)置以下區(qū)域：試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增和產(chǎn)物分析區(qū)。這3個(gè)區(qū)域在物理空間上應(yīng)當(dāng)是完全相互獨(dú)立的，不能有空氣的直接相通。各區(qū)的功能是：

1.試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)：貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴(kuò)增反應(yīng)混合液的制備，以及離心管、吸頭等消耗品的貯存和準(zhǔn)備。

2.標(biāo)本制備區(qū)：轉(zhuǎn)運(yùn)桶的開(kāi)啟，標(biāo)本的滅活（適用時(shí)），核酸提取及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管等。

3.擴(kuò)增和產(chǎn)物分析區(qū)：核酸擴(kuò)增和產(chǎn)物分析。

根據(jù)使用儀器的功能，區(qū)域可適當(dāng)合并。如采用標(biāo)本加樣、核酸提取及擴(kuò)增檢測(cè)為一體的自動(dòng)化分析儀，標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增和產(chǎn)物分析區(qū)可合并。

（三）主要儀器設(shè)備。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)配備與開(kāi)展檢驗(yàn)項(xiàng)目相適宜的儀器設(shè)備，包括核酸提取儀、醫(yī)用PCR擴(kuò)增儀、生物安全柜、病毒滅活設(shè)備（適用時(shí)，如水浴鍋等）、保存試劑和標(biāo)本的冰箱和冰柜、離心機(jī)、不間斷電源（UPS）或備用電源等。

（四）實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)室接到標(biāo)本后，應(yīng)當(dāng)在生物安全柜內(nèi)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行清點(diǎn)核對(duì)。按照標(biāo)準(zhǔn)操作程序進(jìn)行試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本前處理、核酸提取、核酸擴(kuò)增、結(jié)果分析及報(bào)告。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)建立可疑標(biāo)本和陽(yáng)性標(biāo)本復(fù)檢的流程。

1.試劑準(zhǔn)備。應(yīng)當(dāng)選擇國(guó)家藥品監(jiān)督管理部門批準(zhǔn)的試劑，并在選擇標(biāo)本采樣管和核酸提取試劑時(shí)，使用試劑盒說(shuō)明書上建議的配套標(biāo)本采樣管和提取試劑。核酸提取方法與標(biāo)本保存液和滅活方式相關(guān)，有些核酸提取試劑（如磁珠法或者一步法），容易受到胍鹽或保存液中特殊成分的影響，特別是一步法提取多需要使用試劑廠家配套的標(biāo)本采樣管。

2.標(biāo)本前處理。已經(jīng)使用含胍鹽的滅活型標(biāo)本采樣管的實(shí)驗(yàn)室，這一環(huán)節(jié)無(wú)需進(jìn)行滅活處理，直接進(jìn)行核酸提取，而使用非滅活型標(biāo)本采樣管的實(shí)驗(yàn)室，則有56℃孵育30分鐘熱滅活的處理方式。

3.核酸提取。將滅活后的標(biāo)本取出，在生物安全柜內(nèi)打開(kāi)標(biāo)本采集管加樣。核酸提取完成后，立即將提取物進(jìn)行封蓋處理。在生物安全柜內(nèi)將提取核酸加至PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系中。

4.核酸擴(kuò)增。將擴(kuò)增體系放入擴(kuò)增儀，核對(duì)擴(kuò)增程序是否與試劑說(shuō)明書相符，啟動(dòng)擴(kuò)增程序。擴(kuò)增后反應(yīng)管不要開(kāi)蓋，直接放于垃圾袋中，封好袋口，按一般醫(yī)療廢物轉(zhuǎn)移出實(shí)驗(yàn)室處理。

五、實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制與管理

各醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)核酸檢測(cè)質(zhì)量控制。應(yīng)選用擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒指定的核酸提取試劑和擴(kuò)增儀。

（一）性能驗(yàn)證。在用于臨床標(biāo)本檢測(cè)前，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)由提取試劑、提取儀、擴(kuò)增試劑、擴(kuò)增儀等組成檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行必要的性能驗(yàn)證，性能指標(biāo)包括但不限于精密度（至少要有重復(fù)性）和最低檢測(cè)限。建議選用高靈敏的試劑（檢測(cè)限≤500拷貝/ml）。

（二）室內(nèi)質(zhì)控。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)按照《國(guó)家衛(wèi)生健康委辦公廳關(guān)于醫(yī)療機(jī)構(gòu)開(kāi)展新型冠狀病毒核酸檢測(cè)有關(guān)要求的通知》（國(guó)衛(wèi)辦醫(yī)函〔2020〕53號(hào)）要求規(guī)范開(kāi)展室內(nèi)質(zhì)控。每批檢測(cè)至少有1份弱陽(yáng)性質(zhì)控品（第三方質(zhì)控品，通常為檢出限的1.5-3倍）、3份陰性質(zhì)控品（生理鹽水）。質(zhì)控品隨機(jī)放在臨床標(biāo)本中，參與從提取到擴(kuò)增的全過(guò)程。在大規(guī)模人群篩查時(shí)，因人群流行率極低（<0.1%），一旦出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果，對(duì)陽(yáng)性標(biāo)本采用另外一到兩種更為靈敏且擴(kuò)增不同區(qū)域的核酸檢測(cè)試劑對(duì)原始標(biāo)本進(jìn)行復(fù)核檢測(cè)，復(fù)核陽(yáng)性方可報(bào)出。

（三）室間質(zhì)評(píng)。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)常態(tài)化參加國(guó)家級(jí)或省級(jí)臨床檢驗(yàn)中心組織的室間質(zhì)評(píng)。對(duì)檢測(cè)量大以及承擔(dān)重點(diǎn)人群篩查等任務(wù)的實(shí)驗(yàn)室，要適當(dāng)增加室間質(zhì)評(píng)頻率。不按要求參加室間質(zhì)評(píng)的，或室間質(zhì)評(píng)結(jié)果不合格的，或檢測(cè)結(jié)果質(zhì)量問(wèn)題突出的，不得開(kāi)展核酸檢測(cè)。

六、核酸檢測(cè)結(jié)果反饋基本要求

（一）報(bào)告時(shí)限。對(duì)于發(fā)熱門診、急診患者，在6小時(shí)內(nèi)報(bào)告核酸檢測(cè)結(jié)果；對(duì)于普通門診、住院患者及陪護(hù)人員等人群，原則上在12小時(shí)內(nèi)報(bào)告結(jié)果；對(duì)于“愿檢盡檢”人群，一般在24小時(shí)內(nèi)報(bào)告結(jié)果。醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)為受檢者出具檢測(cè)報(bào)告，并告知其查詢方式，不得以任何理由不出具檢測(cè)報(bào)告。

（二）檢測(cè)報(bào)告。各醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)按照《新型冠狀病毒核酸檢測(cè)報(bào)告單》的參考樣式出具檢測(cè)報(bào)告（見(jiàn)附件1），在衛(wèi)生健康行政部門的規(guī)定下，互認(rèn)檢測(cè)結(jié)果。醫(yī)療機(jī)構(gòu)可采用紙質(zhì)、快遞、網(wǎng)絡(luò)或信息化系統(tǒng)等多種形式，發(fā)放核酸檢測(cè)報(bào)告，并注意保護(hù)個(gè)人隱私。發(fā)現(xiàn)核酸檢測(cè)陽(yáng)性結(jié)果時(shí)應(yīng)按相關(guān)要求在12小時(shí)內(nèi)報(bào)告。

七、核酸檢測(cè)安全管理

（一）標(biāo)本安全管理。標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)箱封閉前，須使用75%酒精或0.2%含氯消毒劑噴灑消毒。標(biāo)本包裝應(yīng)符合國(guó)際民航組織文件Doc9284《危險(xiǎn)品航空安全運(yùn)輸技術(shù)細(xì)則》的PI602分類包裝要求。根據(jù)當(dāng)前版本的國(guó)際航空運(yùn)輸協(xié)會(huì)（IATA）《危險(xiǎn)品規(guī)則》，SARS-CoV-2感染疑似和確診患者標(biāo)本屬于UN3373B類生物物質(zhì)，涉及外部標(biāo)本運(yùn)輸?shù)?，?yīng)按照B類感染性物質(zhì)進(jìn)行三層包裝。疑似或確診患者標(biāo)本應(yīng)標(biāo)示有特殊標(biāo)識(shí)，并進(jìn)行單獨(dú)轉(zhuǎn)運(yùn)。檢測(cè)完成后的剩余標(biāo)本，可在結(jié)果報(bào)告發(fā)出到達(dá)其保存時(shí)限要求后，如為檢測(cè)前非滅活標(biāo)本，則裝入專用密封廢物轉(zhuǎn)運(yùn)袋中進(jìn)行壓力蒸汽滅菌處理，隨后隨其他醫(yī)療廢物一起轉(zhuǎn)運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行銷毀處理；如為檢測(cè)前已滅活標(biāo)本，則無(wú)需高壓滅活，直接按醫(yī)療廢物一起轉(zhuǎn)運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行銷毀處理。

（二）實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)安全管理。

1.基本要求。核酸檢測(cè)應(yīng)當(dāng)在生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，并應(yīng)在生物安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的基礎(chǔ)上，采取適當(dāng)?shù)膫€(gè)體防護(hù)措施，包括手套、口罩和隔離衣等。開(kāi)展新冠病毒核酸檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)制定實(shí)驗(yàn)室生物安全相關(guān)程序文件及實(shí)驗(yàn)室生物安全操作失誤或意外的處理操作程序，并有記錄。

2.實(shí)驗(yàn)前安全要求。應(yīng)使用0.2%含氯消毒劑或75%酒精進(jìn)行桌面、臺(tái)面及地面消毒。消毒液需每天新鮮配制，不超過(guò)24小時(shí)。轉(zhuǎn)運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)桶應(yīng)在生物安全柜內(nèi)開(kāi)啟。轉(zhuǎn)運(yùn)桶開(kāi)啟后，使用0.2%含氯消毒劑或75%酒精對(duì)轉(zhuǎn)運(yùn)桶內(nèi)壁和標(biāo)本采集密封袋進(jìn)行噴灑消毒。取出標(biāo)本采集管后，應(yīng)首先檢查標(biāo)本管外壁是否有破損、管口是否泄露或是否有管壁殘留物。確認(rèn)無(wú)滲漏后，推薦用0.2%含氯消毒劑噴灑、擦拭消毒樣品管外表面（此處不建議使用75%酒精，以免破壞標(biāo)本標(biāo)識(shí)）。如發(fā)現(xiàn)滲漏應(yīng)立即用吸水紙覆蓋，并噴灑有效氯含量為0.55%的含氯消毒劑進(jìn)行消毒處理，不得對(duì)標(biāo)本繼續(xù)檢測(cè)操作，做好標(biāo)本不合格記錄后需立即進(jìn)行密封打包，壓力蒸汽滅菌處理后銷毀。

如為采樣管為非滅活管，實(shí)驗(yàn)室操作人員在進(jìn)行標(biāo)本熱滅活時(shí)，溫浴前需旋緊標(biāo)本采集管管蓋，必要時(shí)可用封口膜密閉管蓋；溫浴過(guò)程中可每隔10分鐘將標(biāo)本輕柔搖勻1次，以保證標(biāo)本均勻滅活；溫浴后標(biāo)本需靜置至室溫至少10分鐘使氣溶膠沉降，隨后再開(kāi)蓋進(jìn)行后續(xù)核酸提取。

3.核酸提取和檢測(cè)安全要求。標(biāo)本進(jìn)行核酸提取和檢測(cè)時(shí)應(yīng)盡可能在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行操作。如為打開(kāi)標(biāo)本管蓋或其他有可能產(chǎn)生氣溶膠的操作，則必須在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。

4.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后清潔要求。需對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境進(jìn)行清潔，消除可能的核酸污染。

（1）實(shí)驗(yàn)室空氣清潔。實(shí)驗(yàn)室每次檢測(cè)完畢后，可采用房間固定和/或可移動(dòng)紫外燈進(jìn)行紫外照射2小時(shí)以上。必要時(shí)可采用核酸清除劑等試劑清除實(shí)驗(yàn)室殘留核酸。

（2）工作臺(tái)面清潔。每天實(shí)驗(yàn)后，使用0.2%含氯消毒劑或75%酒精進(jìn)行臺(tái)面、地面清潔。

（3）生物安全柜消毒。實(shí)驗(yàn)使用后的耗材廢棄物放入醫(yī)療廢物垃圾袋中，包扎后使用0.2%含有效氯消毒液或75%酒精噴灑消毒其外表面。手消毒后將垃圾袋帶出生物安全柜放入實(shí)驗(yàn)室廢棄物轉(zhuǎn)運(yùn)袋中。試管架、實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、移液器等使用75%酒精進(jìn)行擦拭。隨后關(guān)閉生物安全柜，紫外燈照射30分鐘。

（4）轉(zhuǎn)運(yùn)容器消毒。轉(zhuǎn)運(yùn)及存放標(biāo)本的容器使用前后需使用0.2%含氯消毒劑或75%酒精進(jìn)行擦拭或噴灑消毒。

（5）塑料或有機(jī)玻璃材質(zhì)物品清潔：使用0.2%含氯消毒劑或過(guò)氧乙酸或過(guò)氧化氫擦拭或噴灑。

（三）實(shí)驗(yàn)室醫(yī)療廢物管理。

1.基本要求。開(kāi)展新冠病毒核酸檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)制定醫(yī)療廢物處置程序及污物、污水處理操作程序。所有的危險(xiǎn)性醫(yī)療廢物必須按照統(tǒng)一規(guī)格化的容器和標(biāo)示方式，完整且合規(guī)地標(biāo)示廢物內(nèi)容。應(yīng)當(dāng)由經(jīng)過(guò)適當(dāng)培訓(xùn)的人員使用適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)裝備和設(shè)備處理危險(xiǎn)性醫(yī)療廢物。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立醫(yī)療廢物處理記錄，定期對(duì)實(shí)驗(yàn)室排風(fēng)HEPA過(guò)濾器進(jìn)行更換，定期對(duì)處理后的污水進(jìn)行監(jiān)測(cè)，采用生物指示劑監(jiān)測(cè)壓力滅菌效果。

2.醫(yī)療廢物的處理措施。醫(yī)療廢物的處理是控制實(shí)驗(yàn)室安全的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，必須充分掌握生物安全廢棄物的分類，并嚴(yán)格執(zhí)行相應(yīng)的處理程序。

（1）廢液的處理。實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)生的廢液可分為普通污水和感染性廢液。普通污水產(chǎn)生于洗手池等設(shè)備，對(duì)此類污水應(yīng)當(dāng)排入實(shí)驗(yàn)室水處理系統(tǒng)，經(jīng)統(tǒng)一處理達(dá)標(biāo)后進(jìn)行排放。感染性廢液即在實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中產(chǎn)生的廢液，需采用化學(xué)消毒（0.55%含氯消毒劑處理）或物理消毒（紫外照射30分鐘以上）方式處理，確認(rèn)徹底消毒滅活后方可排入實(shí)驗(yàn)室水處理系統(tǒng)，經(jīng)統(tǒng)一處理達(dá)標(biāo)后進(jìn)行排放。污水消毒處理效果按GB18466《醫(yī)療機(jī)構(gòu)水污染物排放標(biāo)準(zhǔn)》相關(guān)規(guī)定進(jìn)行評(píng)價(jià)。

（2）固體廢物的處理。實(shí)驗(yàn)室固體廢物應(yīng)當(dāng)分類收集。固體廢物的收集容器應(yīng)當(dāng)具有不易破裂、防滲漏、耐濕耐熱、可密封等特性。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的潛在感染性廢物不允許堆積存放，應(yīng)當(dāng)及時(shí)進(jìn)行壓力蒸汽滅菌處理。廢物處置之前，應(yīng)當(dāng)存放在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)指定的安全位置。小型固體廢物如檢測(cè)耗材、個(gè)人防護(hù)裝備等均需使用雙層防滲漏專用包裝袋打包密封后經(jīng)過(guò)壓力蒸汽滅菌處理，再轉(zhuǎn)運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室。

體積較大的固體廢物如HEPA過(guò)濾器，應(yīng)當(dāng)由專業(yè)人士進(jìn)行原位消毒后，裝入安全容器內(nèi)進(jìn)行消毒滅菌。不能進(jìn)行壓力蒸汽滅菌的物品如電子設(shè)備可采用環(huán)氧乙烷熏蒸消毒處理。經(jīng)消毒滅菌處理后移出實(shí)驗(yàn)室的固體廢物需集中交由醫(yī)療廢物處理單位進(jìn)行處置。

（四）實(shí)驗(yàn)室污染的處理。

1.標(biāo)本污染生物安全柜的操作臺(tái)造成局限污染時(shí)：立即用吸水紙覆蓋，并使用0.55%含氯消毒劑進(jìn)行噴灑消毒。消毒液需要現(xiàn)用現(xiàn)配，24小時(shí)內(nèi)使用。

2.標(biāo)本傾覆造成實(shí)驗(yàn)室污染時(shí)：保持實(shí)驗(yàn)室空間密閉，避免污染物擴(kuò)散。立即使用潤(rùn)濕有0.55%含氯消毒劑的毛巾覆蓋污染區(qū)。必要時(shí)（如大量溢撒時(shí)）可用過(guò)氧乙酸加熱熏蒸實(shí)驗(yàn)室，劑量為2g/m3，熏蒸過(guò)夜；或20g/L過(guò)氧乙酸消毒液用氣溶膠噴霧器噴霧，用量8ml/m3，作用1-2小時(shí)；必要時(shí)或用高錳酸鉀-甲醛熏蒸：高錳酸鉀8g/m3，放入耐熱耐腐蝕容器（陶罐或玻璃容器），后加入甲醛（40%）10ml/m3，熏蒸4小時(shí)以上。熏蒸時(shí)室內(nèi)濕度60%-80%。

3.清理污染物時(shí)嚴(yán)格遵循活病毒生物安全操作要求，采用壓力蒸汽滅菌處理，并進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室換氣等，防止次生危害。

八、核酸檢測(cè)信息化管理

醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)在衛(wèi)生健康行政部門統(tǒng)籌下，做好標(biāo)本采集、核酸檢測(cè)、檢測(cè)報(bào)告的信息對(duì)接工作。建立統(tǒng)一的信息采集掃碼程序，信息應(yīng)至少包括姓名、性別、年齡、身份證號(hào)、聯(lián)系電話，做到標(biāo)本采集的個(gè)人信息與醫(yī)療機(jī)構(gòu)信息系統(tǒng)順利對(duì)接，各醫(yī)療機(jī)構(gòu)間應(yīng)做到信息互通、互采、互認(rèn)。

九、標(biāo)本混采

在人群篩查時(shí)可以考慮采用混采的方案進(jìn)行，以提升核酸檢測(cè)效率?；旌蠘?biāo)本數(shù)可以為10個(gè)或者10個(gè)以下（如5合1）。以10合1或5合1混采為例，與單檢流程不同的主要為采集、送檢和檢測(cè)結(jié)果的處理。其余工作要求均與單檢相同。

（一）采集和送檢流程。

1.標(biāo)識(shí)及信息登記。

（1）登記流程。工作人員在采集前分配10個(gè)或5個(gè)受檢者為一組，采集前收集并登記受檢者相關(guān)信息（包括姓名、性別、身份證號(hào)、聯(lián)系電話、采集地點(diǎn)、采集日期和時(shí)間），按照組別進(jìn)行采集管編號(hào)。

（2）登記要求。推薦使用身份證讀卡器、二維碼條碼等信息化手段關(guān)聯(lián)受檢者信息，提高信息讀取效率和準(zhǔn)確性。如不具備信息化條件，應(yīng)當(dāng)提前登記《新冠病毒核酸10合1或5合1混采檢測(cè)登記表》（舉例見(jiàn)附件2的10合1混采，以下簡(jiǎn)稱混采登記表）。紙質(zhì)登記表隨標(biāo)本送檢前應(yīng)當(dāng)備份存檔于采集點(diǎn)所在社區(qū)，便于及時(shí)追溯受檢者。

2.標(biāo)本采集和混合拭子。將完成采集的10支或5支拭子放入同一采集管（10合1采樣管保存液應(yīng)為6mL，5合1采樣管保存液與單檢采樣管相同，為3mL）中，動(dòng)作輕柔，避免氣溶膠產(chǎn)生。連續(xù)采集10支或5支拭子以后，旋緊管蓋，防止溢灑。如采集管內(nèi)拭子不足10支或5支，應(yīng)做好特殊標(biāo)記并記錄。

3.標(biāo)本送檢。核對(duì)采集管標(biāo)簽與混采登記表信息，確保準(zhǔn)確完整，編號(hào)一致。

（二）檢測(cè)結(jié)果的處理。

1.混采檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性、灰區(qū)或單個(gè)靶標(biāo)陽(yáng)性，通知相關(guān)部門對(duì)該混采管的10個(gè)或5個(gè)受試者暫時(shí)單獨(dú)隔離，并重新采集單管拭子進(jìn)行復(fù)核。

2.復(fù)核單管核酸檢測(cè)如均為陰性，則按照陰性結(jié)果報(bào)告。暫時(shí)隔離人員即解除隔離；如檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性，按程序上報(bào)。

十、其他要求

因疫情防控需要等因素，醫(yī)療機(jī)構(gòu)采集的標(biāo)本量明顯超出自身檢測(cè)能力范圍的，可以建立醫(yī)療機(jī)構(gòu)間新冠病毒核酸檢測(cè)協(xié)作機(jī)制，分散檢測(cè)壓力，保證時(shí)效性和有效性。

對(duì)集中隔離人員，要通過(guò)鼻咽拭子采集上呼吸道標(biāo)本，并選擇高靈敏（檢測(cè)限≤500拷貝/ml）的試劑。原則上，提取試劑、提取儀、擴(kuò)增試劑和擴(kuò)增儀應(yīng)當(dāng)配套使用，并在檢測(cè)前進(jìn)行性能驗(yàn)證。鼓勵(lì)在兩個(gè)以上檢測(cè)機(jī)構(gòu)通過(guò)不同設(shè)備和試劑，對(duì)集中隔離人員的樣本進(jìn)行平行檢測(cè)，進(jìn)一步提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。其中，入境人員應(yīng)當(dāng)至少在開(kāi)始集中隔離和解除隔離時(shí)各進(jìn)行一次核酸檢測(cè)，隔離期間如出現(xiàn)癥狀應(yīng)當(dāng)及時(shí)檢測(cè)；入境人員要采用高靈敏（檢測(cè)限≤500拷貝/ml）和雙靶區(qū)域以上的試劑進(jìn)行檢測(cè)，以降低因試劑靈敏度不足或病毒變異可能造成的漏檢風(fēng)險(xiǎn)。