色譜分離法的分類對于備考的考生朋友們來說是一個必須了解的知識點,為此醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)的小編特為您整理如下:
色譜分離法分類:
色譜法是目前分離三萜類化合物最常用的方法,通常采用多種色譜法相組合的方法:
①吸附柱色譜法;②分配柱色譜法;③高效液相色譜法;④大孔樹脂柱色譜;⑤凝膠色譜法。
(1)吸附柱色譜法:
①常用方法,可用于分離各類三萜化合物。
②依據(jù)所用的吸附劑性質(zhì)的不同,分為正相吸附柱色譜和反相吸附柱色譜。
③正相吸附柱色譜的吸附劑常用硅膠。
④反相柱色譜通常以鍵合相硅膠Rp-18、Rp-8或Rp-2等為填充劑。
(2)分配柱色譜法:多用于分離皂苷,常用硅膠等作為支持劑,固定相為3%草酸水溶液等,流動相為含水的混合有機溶劑:如氯仿-甲醇-水,正丁醇-水等。
(3)高效液相色譜法:是目前分離皂苷類化合物最常用的方法,分離效能較高。用于皂苷的分離制備一般采用反相色譜柱,以甲醇-水、乙腈-水等系統(tǒng)為洗脫劑。
(4)大孔樹脂柱色譜:適用于皂苷的精制和初步分離。
操作:將含有皂苷的水溶液通過大孔樹脂柱后,先用水洗滌除去糖和其他水溶性雜質(zhì),醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理然后再用濃度由低到高的甲醇或乙醇依次進行梯度洗脫,極性大的皂苷可被l0%~30%的醇洗脫下來,極性小的皂苷則被50%以上的醇洗脫下來。
(5)凝膠色譜法:分子篩的原理來分離分子量不同的化合物,在用不同濃度的甲醇、乙醇或水等溶劑洗脫時,各成分按分子量遞減順序依次被洗脫下來。即分子量大的皂苷先被洗脫下來,分子量小的皂苷后被洗脫下來。應(yīng)用較多的是在有機相中使用的SephadexLH-20.
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