方法名稱： 雙唑泰栓－甲硝唑、克霉唑與醋酸氯己定－高效液相色譜法

應(yīng)用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測定雙唑泰栓中甲硝唑、克霉唑與醋酸氯己定的含量。

本方法適用于雙唑泰栓。

方法原理： 供試品置70~80℃水浴上溫?zé)崛廴?，?jīng)流動相溶解進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長260nm處檢測甲硝唑、克霉唑與醋酸氯己定的峰面積，計(jì)算出其含量。

試劑： 1. 甲醇

2.三乙胺

3. 庚烷磺酸鈉

4. 磷酸

儀器設(shè)備： 1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按克霉唑峰計(jì)算應(yīng)不低于2500，甲硝唑峰、克霉唑峰與氯己定峰的分離度應(yīng)符合要求。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：甲醇 水 三乙胺=70 30 0.3（含庚烷磺酸鈉10mmol/L，用磷酸調(diào)pH值至4.0）

2.2 檢測波長：260nm

2.3 柱溫：室溫

試樣制備： 1. 稱取供試品

取供試品10粒，精密稱定，置小燒杯中，置70~80℃水浴上溫?zé)崛廴冢诓粩鄶嚢柘吕鋮s至室溫，精密稱取適量（約相當(dāng)于甲硝唑20mg）為供試品。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取甲硝唑、克霉唑與醋酸氯己定對照品適量，用流動相溶解并定量稀釋，制成每1mL約含甲硝唑200µg、克霉唑160µg與醋酸氯己定80µg的溶液，即為對照品溶液。

3. 供試品溶液的制備

取供試品置100mL量瓶中，加流動相適量，置70~80℃中充分振搖10分鐘，使供試品溶解，冷卻至室溫，用流動相稀釋至刻度，搖勻，置冰浴中冷卻2小時，取出迅速濾過，待續(xù)濾液放置至室溫，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長260nm處測定甲硝唑（C6H9N3O3）、克霉唑（C22H17ClN2）與醋酸氯己定（C22H30Cl2N10·2C2H4O2）的峰面積，計(jì)算出其含量。