方法名稱： 雙唑泰栓－甲硝唑、克霉唑與醋酸氯己定－高效液相色譜法

應用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測定雙唑泰栓中甲硝唑、克霉唑與醋酸氯己定的含量。

本方法適用于雙唑泰栓。

方法原理： 供試品置70~80℃水浴上溫熱熔融，經(jīng)流動相溶解進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長260nm處檢測甲硝唑、克霉唑與醋酸氯己定的峰面積，計算出其含量。

試劑： 1. 甲醇

2.三乙胺

3. 庚烷磺酸鈉

4. 磷酸

儀器設備： 1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按克霉唑峰計算應不低于2500，甲硝唑峰、克霉唑峰與氯己定峰的分離度應符合要求。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：甲醇 水 三乙胺=70 30 0.3（含庚烷磺酸鈉10mmol/L，用磷酸調(diào)pH值至4.0）

2.2 檢測波長：260nm

2.3 柱溫：室溫

試樣制備： 1. 稱取供試品

取供試品10粒，精密稱定，置小燒杯中，置70~80℃水浴上溫熱熔融，在不斷攪拌下冷卻至室溫，精密稱取適量（約相當于甲硝唑20mg）為供試品。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取甲硝唑、克霉唑與醋酸氯己定對照品適量，用流動相溶解并定量稀釋，制成每1mL約含甲硝唑200µg、克霉唑160µg與醋酸氯己定80µg的溶液，即為對照品溶液。

3. 供試品溶液的制備

取供試品置100mL量瓶中，加流動相適量，置70~80℃中充分振搖10分鐘，使供試品溶解，冷卻至室溫，用流動相稀釋至刻度，搖勻，置冰浴中冷卻2小時，取出迅速濾過，待續(xù)濾液放置至室溫，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長260nm處測定甲硝唑（C6H9N3O3）、克霉唑（C22H17ClN2）與醋酸氯己定（C22H30Cl2N10·2C2H4O2）的峰面積，計算出其含量。