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肌苷片-測定方法

2012-11-07 20:27 醫(yī)學教育網(wǎng)
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方法名稱: 肌苷片-肌苷-高效液相色譜法

應用范圍: 本方法采用高效液相色譜法測定肌苷片中肌苷的含量。

本方法適用于肌苷片。

方法原理: 供試品研細,加水定量稀釋制成供試液,進入高效液相色譜儀進行色譜分離,用紫外吸收檢測器,于波長248nm處檢測肌苷的峰面積,計算出其含量。

試劑: 甲醇

儀器設備: 1.儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,理論塔板數(shù)按肌苷峰計算應不低于2000。

1.3 紫外吸收檢測器

2.色譜條件

2.1 流動相:甲醇 水=10 90

2.2 檢測波長:248nm

2.3 柱溫:室溫

試樣制備: 1. 對照品溶液的制備

精密稱取肌苷對照品適量,加水溶解制成每1mL中約含20µg的溶液,即為對照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

取供試品10片(如為糖衣片,應除去包衣),精密稱定,研細,精密稱取適量(約相當于肌苷0.1g),置100mL量瓶中,加水約70mL,充分振搖使肌苷溶解,用水稀釋至刻度,搖勻,濾過,精密量取續(xù)濾液2mL,置100mL量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,即為供試品溶液。

注:“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟: 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20mL,注入高效液相色譜儀,用紫外吸收檢測器于波長248nm處測定肌苷(C10H12N4O5)的峰面積,計算出其含量。

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