方法名稱：

潑尼松的測(cè)定—高效液相色譜法

應(yīng)用范圍：

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定潑尼松的含量。

本方法適用潑尼松。

方法原理：

供試品和內(nèi)標(biāo)均制成甲醇溶液，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)254nm處檢測(cè)潑尼松（C21H26O5）和內(nèi)標(biāo)乙酰苯胺的吸收值，計(jì)算出其含量。

試劑：

1．甲醇

2．水

3．四氫呋喃

4．稀甲醇（1→2）

儀器設(shè)備：

1． 儀器

1．1 高效液相色譜儀

1．2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按潑尼松峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。

1．3 紫外吸收檢測(cè)器

2． 色譜條件

2．1 流動(dòng)相：水四氫呋喃+甲醇= 688 250 62

2．2 檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm

2．3 柱溫：室溫

試樣制備：

1． 稱取供試品

取本品適量，精密稱定。

2． 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取潑尼松對(duì)照品適量，加甲醇溶解并稀釋成溶液。

3． 內(nèi)標(biāo)溶液的制備

取乙酰苯胺適量，加稀甲醇制成每1mL中約含有0.11mg的溶液，即得。

4． 供試品溶液的制備

上述供試品加稀甲醇溶解并定量稀釋成每1mL中約含0.2mg的溶液，即得供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

操作步驟：

分別精密吸取上述供試品溶液與內(nèi)標(biāo)溶液5mL，置50mL量瓶中，用稀甲醇稀釋至刻度，混合均勻，取10μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)254nm處測(cè)定炔諾孕酮和內(nèi)標(biāo)醋酸甲地孕酮的吸收值，按內(nèi)標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。另取潑尼松對(duì)照品溶液，同法測(cè)定。

參考文獻(xiàn)：

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p368。