方法名稱：

格列本脲的測定—高效液相色譜法

應用范圍：

該方法采用高效液相色譜法測定格列本脲的含量。

該方法適用格列本脲。

方法原理：

該方法采用高效液相色譜法測定格列本脲的含量。

該方法適用格列本脲。

試劑：

1.甲醇

2. 磷酸二氫銨溶液：取磷酸二氫銨1.725g，加水300mL溶解，用磷酸調節(jié)pH值至3.5±0.05。

儀器設備：

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數按格列本脲峰計算應不低于 1000，格列本脲峰與內標物質峰的分離度應符合要求。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：甲醇 磷酸二氫銨溶液=5 3

2.2 檢測波長：274nm

2.3 柱溫：室溫

試樣制備：

1. 稱取供試品

取該品20mg，精密稱定。

2. 內標溶液的制備

取對羥基苯甲酸丁酯10mg，置100mL量瓶中，加甲醇6mL，超聲處理使溶解后，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。

3. 供試品溶液的制備

上述供試品置50mL量瓶中，加甲醇12mL，超聲處理使格列本脲溶解，加流動相稀釋至刻度，精密量取該溶液25mL與內標溶液5mL，至50mL量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

4. 對照品溶液的制備

精密稱取格列本脲對照品適量，與供試品同法配制。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟：

精密量取上述供試品溶液及對照品溶液20μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長274nm處測定格列本脲及內標對羥基苯甲酸丁酯的吸收值，按內標法以峰面積計算，即得。

參考文獻：

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005年版，二部，p594。