方法名稱：

格列本脲的測定—高效液相色譜法

應(yīng)用范圍：

該方法采用高效液相色譜法測定格列本脲的含量。

該方法適用格列本脲。

方法原理：

該方法采用高效液相色譜法測定格列本脲的含量。

該方法適用格列本脲。

試劑：

1.甲醇

2. 磷酸二氫銨溶液：取磷酸二氫銨1.725g，加水300mL溶解，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.5±0.05。

儀器設(shè)備：

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按格列本脲峰計(jì)算應(yīng)不低于 1000，格列本脲峰與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰的分離度應(yīng)符合要求。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：甲醇 磷酸二氫銨溶液=5 3

2.2 檢測波長：274nm

2.3 柱溫：室溫

試樣制備：

1. 稱取供試品

取該品20mg，精密稱定。

2. 內(nèi)標(biāo)溶液的制備

取對(duì)羥基苯甲酸丁酯10mg，置100mL量瓶中，加甲醇6mL，超聲處理使溶解后，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得。

3. 供試品溶液的制備

上述供試品置50mL量瓶中，加甲醇12mL，超聲處理使格列本脲溶解，加流動(dòng)相稀釋至刻度，精密量取該溶液25mL與內(nèi)標(biāo)溶液5mL，至50mL量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

4. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取格列本脲對(duì)照品適量，與供試品同法配制。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

操作步驟：

精密量取上述供試品溶液及對(duì)照品溶液20μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長274nm處測定格列本脲及內(nèi)標(biāo)對(duì)羥基苯甲酸丁酯的吸收值，按內(nèi)標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。

參考文獻(xiàn)：

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p594。